【摘 要】
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目的:检测LAMA3基因在甲状腺乳头状癌细胞株(TPC-1、K1、BCPAP)和人正常甲状腺细胞株 Nthy-1、甲状腺乳头状癌病人癌组织和癌旁组织中的表达水平,然后构建细胞模型,体外进行一系列功能试验,探索该基因在甲状腺乳头状癌中发挥的功能。方法:1)收集56例甲状腺乳头状癌患者的癌和癌旁组织样本;复苏、培养甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP、TPC-1、K1及人甲状腺正常细胞株Nthy-1;利用q
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目的:检测LAMA3基因在甲状腺乳头状癌细胞株(TPC-1、K1、BCPAP)和人正常甲状腺细胞株 Nthy-1、甲状腺乳头状癌病人癌组织和癌旁组织中的表达水平,然后构建细胞模型,体外进行一系列功能试验,探索该基因在甲状腺乳头状癌中发挥的功能。方法:1)收集56例甲状腺乳头状癌患者的癌和癌旁组织样本;复苏、培养甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP、TPC-1、K1及人甲状腺正常细胞株Nthy-1;利用qRT-PCR和Western Blot技术分别在细胞和组织水平检测LAMA3基因的表达水平;综合并分析上述结果与测序结果是否一致。2)利用shRNA基因敲低技术在甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP、TPC-1、K1中构建LAMA3基因敲低细胞模型;利用荧光显微镜观察和qRT-PCR技术分别检测基因敲减效果,筛选出可用的细胞模型。3)利用CCK-8、细胞划痕和Transwell实验探究LAMA3基因低表达对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。结果:1)甲状腺乳头状癌中,LAMA3基因mRNA的表达在细胞和组织水平都显著偏高,蛋白的表达在细胞水平显著偏高、组织水平有偏高趋势,但差异不显著。2)LAMA3-siRNA-1质粒转入K1和TPC-1细胞后成功构建LAMA3基因显著低表达细胞模型。3)K1细胞中,LAMA3基因敲低后显著抑制了细胞的增殖、迁移和转移能力。LAMA3基因对TPC-1细胞的增殖、迁移和转移能力无明显影响。结论:LAMA3基因在甲状腺乳头状癌中显著过表达,且对甲状腺乳头状癌细胞株K1的增殖、迁移和侵袭能力有显著促进作用。本文对LAMA3基因的深入研究,或许能更有效的帮我们找到甲状腺乳头状癌诊断及治疗的切入点。
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