柱状黄杆菌的拮抗菌筛选及其对鲫鱼生长性能和免疫功能的影响

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本试验通过从池塘水样中筛选分离出对柱状黄杆菌产生拮抗性的两株菌种,对其进行分离鉴定及初步筛选。将筛选出的两株益生菌与基础饲料混合,配制出含三种不同益生菌饲料:基础饲料(对照组T0)、添加解淀粉芽孢杆菌的基础饲料(处理组T1)、添加约氏不动杆菌的基础饲料(处理组T2)和添加解淀粉芽孢杆菌、约氏不动杆菌混合组(处理组T3),分别喂养40天后,检测其对野生鲫鱼生长性能、血清生化指标及免疫指标的影响。1.拮抗菌的分离鉴定及筛选。针对病原柱状黄杆菌,从池塘水体中分离出几株拮抗菌。经16S r RNA基因序列分析测定,分别鉴定为解淀粉芽孢杆菌,约氏不动杆菌。对两株菌的耐酸、耐胆碱性及生长特性进行了研究。2.饲料中添加解淀粉芽孢杆菌和约氏不动杆菌对野生鲫鱼生长性能、血清生化指标及免疫指标的影响。饲养40d后,结果表明,T1组中血清总胆红素、直接胆红素含量低于对照组(p<0.05)。另外,处理T2组中血清间接胆红素含量和谷草/谷丙低于对照组(p<0.05)。在免疫学方面,混合菌T3组的血清Ig G含量相较于对照组T0升高(p<0.05)。三组处理组碱性磷酸酶活力显著升高相较于对照组(p<0.05)。与T0相比较,T1和T2组超敏C反应蛋白含量显著性降低(p<0.05)。添加约氏不动杆菌后T2组显著降低丙二醛含量(p<0.05)。血清中的超氧化物歧化酶均无差异。结果表明,添加到饲料中的解淀粉芽孢杆菌和约氏不动杆菌可以提高血清免疫球蛋白水平和部分非特异性免疫参数含量,同时约氏不动杆菌还能增强野生鲫鱼的抗氧化能力。3.腹腔注射解淀粉芽孢杆菌及约氏不动杆菌对野生鲫鱼血清免疫指标的影响。在注射无菌生理盐水和1×106、1×107、1×108、1×109(CFU/m L)的混合菌液(1:1)以及两种1×108(CFU/m L)的单菌溶液24 h,48 h,96 h后,血清中的碱性磷酸酶在48 h后,两种菌单独注射后均高于对照组p<0.05。所有处理组血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶等指标含量,24 h后均低于对照组p<0.05,但48 h,96 h后天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶没有显著性差异。本文通过筛选出对柱状黄杆菌的两株拮抗菌,分别分析鉴定为解淀粉芽孢杆菌及约氏不动杆菌。将两种菌添加到饲料中喂养野生鲫鱼,40 d养殖周期后检测野生鲫鱼的生长性能与免疫指标,以期开发对水产养殖具有潜力的益生菌。
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