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目的:
探讨二氧化碳气腹后对大鼠肝脏、肾脏造成的缺血再灌注损伤,以及异丙酚在此过程中的保护作用。
材料与方法:
一、实验材料
选用成年Wistar雄性大鼠280-320克左右,实验前禁食24小时,自由饮水。
二、动物分组及模型复制
成年Wistar雄性大鼠24只,随机分成4组,每组6只:
A组:对照组,未经任何处理,尾静脉泵注生理盐水1h(10ml/kg/h)B组:缺血组:在A组基础上给予20mmHg气腹压力1hC组:再灌注组,在A组的基础上,气腹1h,气腹后0.5h。
D组:异丙酚组,20mmHg气腹1h,气腹后0.5h,经尾静脉泵注异丙酚10mg/kg/h(异丙酚原液用生理盐水做10倍稀释)。
10%水合氯醛(3ml/kg)经大鼠腹腔麻醉,皮肤消毒处理后,腹部插入气腹针,气腹压力20mmHg,颈动脉剖开插管监测MAP。各组在术后个时点自颈动脉采血离心(3000转/分,10分钟),取上层血清冰冻待检肝、肾功能,并取肝脏及肾脏组织液氮中冷冻后待检SOD、MDA。
三、检测指标及方法
(1)谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)测定:生化检测;
(2)超氧化物歧化酶(SOD)测定:用黄嘌呤氧化酶法测定。通过黄嘌呤氧化酶反应系统产生离子自由基,后者氧化羟胺形成亚硝酸盐,在显色剂的作用下呈现紫红色,用比色测定其吸光度,结果以亚硝酸盐表示。严格按照说明书要求进行。
(3)丙二醛(MDA)测定:用硫代巴比妥酸比色法测定。利用过氧化脂质主要降解产物丙二醛在酸性条件下两分子硫代巴比妥缩合生成红色物质,于532nm比色测定。严格按照说明书要求进行。
四、统计分析
应用统计学软件SPSS 11.5进行统计,数据均以x±s表示,行独立样本T检验,P<0.05为差异有显著性。
结果:
1、各组AST、ALT、BUN、Cr的变化B组血清中AST、ALT、BUN、Cr含量明显高于A组,差异有显著性P<0.05;C组血清中AST、ALT、BUN、Cr含量明显高于B组,差异有显著性P<0.05;D组血清中AS7、ALT、BUN、Cr含量明显低于C组,差异有显著性P<0.05;
2、各组SOD、MDA的变化B组与A组比较,血清中MDA含量明显升高,差异有显著性P<0.05;血清中SOD含量明显降低,差异有显著性P<0.05C组与B组比较,血清中MDA含量明显升高,差异有显著性P<0.05:血清中SOD含量明显降低,差异有显著性P<0.05D组与C组比较,血清中MDA含量明显降低,差异有显著性P<0.05;血清中SOD含量明显升高,差异有显著性P<0.05.
结论:
1、二氧化碳高气腹压对大鼠肝脏、肾脏造成了缺血性损伤。
2、气腹后这种损伤并没有停止而是继续加重,即:再灌注损伤.
3、异丙酚对气腹后造成的肝脏和肾脏的缺血再灌注损伤具有保护作用.