肠产毒素大肠杆菌高免蛋黄粉抗体的吸收及若干因子对其活性影响的初步研究

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抗大肠杆菌蛋黄抗体粉是目前用来有效治疗仔猪大肠杆菌性腹泻的生物制剂。本实验以抗大肠杆菌(K88、K99、987P)蛋黄抗体粉为研究材料,探索蛋黄抗体粉中的IgY能否通过仔猪的肠道粘膜到达全身作用;验证抗大肠杆菌(K88、K99、987P)蛋黄抗体粉对仔猪腹泻的治疗效果;研究蛋黄抗体粉中IgY对温度、pH、贮存时间及胃蛋白酶的稳定性。实验分四个系列: 实验系列一 两周龄内的哺乳仔猪19头、45日龄断奶仔猪6头及成年大鼠8只,分别口服蛋黄抗体粉悬液。于给予蛋黄抗体前后分别采血,用血凝抑制实验检测血清抗大肠杆菌(K88)免疫活性。发现部分哺乳仔猪外周血清抗大肠杆菌(K88)免疫活性升高,提示蛋黄抗体可通过哺乳仔猪(11-13日龄)胃肠道壁吸收入全身血液循环。 实验系列二 1)用5级不同的温度梯度(50℃-90℃)处理抗大肠杆菌(K88、K99、987P)蛋黄抗体粉,每30分钟取样,检测活性;2)用不同pH值(1.27-11)的溶液处理蛋黄抗体粉,检测抗体活性;3)5种蛋黄抗体粉于4℃存放不同的时间(2个月、4个月、6个月、10个月、16个月),存放前后测定活性。结果表明,蛋黄粉中的IgY对温度的稳定性良好,70℃时活性开始丢失,90℃时活性迅速下降;pH小于4.0,IgY开始失活,pH1.27活性仅残余25%;于4℃存放2-4个月,活性基本保持不变,6个月以上活性开始丢失。 实验系列三 胃蛋白酶与蛋黄粉以3:100比例混合,混悬于37℃ pH4.0的缓冲液,测定样品中的抗大肠杆菌(K88)免疫活性。发现消化后一段时间内样品抗大肠杆菌(K88)活性升高。 实验系列四 口服抗大肠杆菌(K88、K99、987P)蛋黄抗体粉与肌肉注射抗生素比较,治疗本地猪场中发生黄痢和白痢的仔猪窝群,结果表明,蛋黄抗体粉与抗生素有相同的保护作用,保护率100%。
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