乳中谷氨酰胺含量测定方法的建立及猪乳中谷氨酰胺水平动态变化规律的研究

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本试验共三个系列,建立了一种快速、简便、准确和高效的测定动物乳中游离谷氨酰胺(Glutamine,Gln)的方法,系统研究猪分娩后35天内乳中Gln含量的动态变化,并进行了断奶仔猪饲料中添加Gln的研究,为开发应用Gln提供理论依据。 系列Ⅰ 建立了一种准确、简便、快速的高效液相色谱法,快速测定乳中Gln的含量。用反相C18柱为固定相,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,50mmol/L醋酸缓冲液(pH6.50):乙腈(97.7:2.3)为流动相,进行单泵洗脱,在波长254nm处检测Gln的含量。结果是线性范围为25-500μmol/L,线性回归方程为A=31412.8C+111998.39,相关系数r=O.9987,批内变异系数为3.64%,高低两种浓度的回收率分别为104.6%和99.9%,牛乳中Gln的参考值为46.8±21.5μmol/L(分娩后90d);羊乳中为352.4±36.5μmol/L(分娩后25d);猪乳中为29.2±11.5μmol/L(分娩后第1d)。结果表明本法简便、快速、无需梯度洗脱、分离效果好,适用于有关动物乳中游离Gln的检测和研究。 系列Ⅱ 选用长白×约克二元杂交待产母猪10头,产后35d断奶。自分娩之日起至产后35d采集乳样,每两天取乳1次。挤乳时要从前、中、后乳头分别采集乳汁大约1ml混匀后备用。测定方法同系列Ⅰ。结果表明,猪乳中游离Gln含量在产后第1d为29.22μmol/L,随时间推移呈上升趋势,至产后27d(593.74μmol/L),达到高峰,随后逐渐下降。Gln含量在13至21d有一波动,17d是波动的低谷,波动的幅度为15.34μmol/L,波峰与波谷相比差异不显著。 系列Ⅲ 选用胎次、体重相同的杜洛克×长白×大约克三元杂交仔猪12窝(每窝平均10头仔猪),随机分为4组(分别为对照组、0.5%Gln组、1.0%Gln组、1.5%Gln组),每组3窝,公母各半。试验期为 第2页产后 21d至 42d,28d断奶。结果表明在断奶前 1周的仔猪饲料中添加Gin可以明显提高28d断奶仔猪的乎均日增重,改善饲料报酬,降低腹泻率,死亡率。Gin添加量为1.0%时效果最佳。
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