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目的:探讨胚胎后肾间充质干细胞对阿霉素肾病(微小病变型)大鼠足细胞Nephrin、Podocin表达的影响。方法:实验分三组:对照组、模型组和RIMM-18细胞组。模型组、细胞组采用单次尾静脉注射阿霉素5 mg/kg造模,3天后细胞组给予注射1×10~7RIMM-18细胞(胚胎后肾间充质干细胞)。对照组给予正常大鼠尾静脉注射生理盐水,3天后对照组给予尾静脉注射1mL无血清培养基。造模后第6、17、31天检测各组大鼠的24h尿蛋白、血清白蛋白、血清胆固醇及肾脏病理改变,采用免疫荧光及Westernblot检测各组大鼠Nephrin、Podocin的表达情况。结果:(1)制模成功。(2)RIMM-18细胞对实验大鼠24h尿蛋白的影响:对照组、模型组、细胞组三组大鼠造模后第6天尿蛋白分别为10.15±0.47mg/L、10.98±0.85mg/L、10.92±0.73mg/L,三组大鼠间24小时蛋白尿没有明显差异(P＞0.05),第17天分别为10.32±0.57mg/L、83.88±7.88mg/L、78.5±6.44mg/L,模型组与细胞组之间无明显差异(P＞0.05),而两组24小时尿蛋白明显高于对照组(P＜0.01),第31天分别为10.27±1.21mg/L、150.33±8.8mg/L、111.68±8.66mg/L,细胞组24小时尿蛋白明显低于模型组(P＜0.01),而细胞组与模型组24小时尿蛋白明显高于对照组(P＜0.01)。(3)RIMM-18细胞对实验大鼠血清白蛋白的影响:对照组、模型组、细胞组三组大鼠造模后第6天血清白蛋白分别为40.47±1.03g/L、39.05±1.39g/L、37.88±1.81g/L,三组大鼠间血清白蛋白没有明显差异(P＞0.05);第17天分别为39.83±1.32g/L、21.54±1.86g/L、23.68±1.68g/L,模型组与细胞组之间无明显差异(P＞0.05),而两组血清白蛋白明显低于对照组(P＜0.01);第31天分别为38.98±1.41g/L、15.72±1.03g/L、22.13±1.54g/L,细胞组血清白蛋白明显高于模型组(P＜0.01),而细胞组与模型组血清白蛋白明显低于对照组(P＜0.01)。(4)RIMM-18细胞对实验大鼠血清胆固醇的影响:对照组、模型组、细胞组三组大鼠造模后第6天血清胆固醇分别为1.23±0.11mmol/L、1.33±0.11mmol/L、1.27±0.13mmol/L,三组大鼠间血清胆固醇没有明显差异(P＞0.05);第17天分别为1.17±0.14mmol/L、6.25±0.43mmol/L、6±0.23mmol/L,模型组与细胞组之间无明显差异(P＞0.05),而两组血清胆固醇明显高于对照组(P＜0.01);第31天分别1.2±0.13mmol/L、8.4±0.36 mmol/L、5.7±0.36mmol/L,细胞组血清胆固醇明显低于模型组(P＜0.01),而细胞组与模型组血清胆固醇明显高于对照组(P＜0.01)。(5)胚胎后肾间充质干细胞对实验大鼠肾组织病理的影响:光镜下肾组织病理改变不明显,各组之间无明显差别。电镜下模型组与对照组相比,造模后第6天即可见足突轻度融合,第17天足突节段性融合,第31天出现足突广泛融合,而细胞组在第6、17天与模型组及相比无明显差别,于31天细胞组足突融合情况较模型组减轻。(6)胚胎后肾间充质干细胞对实验大鼠肾小球足细胞蛋白Nephrin、Podocin表达的影响:①对照组大鼠肾组织免疫荧光染色足细胞裂孔膜蛋白Nephrin及Podocin沿肾小球毛细血管袢呈连续线状分布。模型组第6天即可发现Nephrin、Podocin免疫荧光染色表现为不连续段状,并随着病情的发展荧光强度逐渐减弱;细胞组免疫荧光染色在第6、17天与模型组相比没有明显差别,第31天荧光强度明显强于模型组。②蛋白质表达:在第6天对照组模型组及细胞组大鼠肾组织足细胞标志蛋白Nephrin分别表达为0.74±0.03、0.53±0.04、0.55±0.09,模型组及细胞组与对照组相比Nephrin表达明显下调(P＜0.01),在第17天模型组及细胞组大鼠肾组织足细胞标志蛋白Nephrin分别表达为0.29±0.05、0.32±0.04,两者之间无明显差异(P＞0.05);在第31天对照组、模型组及细胞组大鼠肾组织足细胞标志蛋白Nephrin分别表达为0.73±0.04、0.15±0.01、0.21±0.02,细胞组Nephrin蛋白的表达明显高于模型组(P＜0.01),模型组及细胞组Nephrin蛋白的表达明显低于对照组(P＜0.01)。在第6天对照组、模型组及细胞组大鼠肾组织足细胞标志蛋白Podocin分别表达为0.47±0.02、0.28±0.01、0.3±0.02,模型组及细胞组与对照组相比Podocin表达明显下调(P＜0.01),在第17天模型组及细胞组大鼠肾组织足细胞标志蛋白Podocin分别表达为0.18±0.02、0.19±0.01,两者之间无明显差异(P＞0.05);在第31天对照组、模型组及细胞组大鼠肾组织足细胞标志蛋白Podocin分别表达为0.48±0.02、0.08±0.01、0.12±0.03,细胞组Podocin蛋白的表达明显高于模型组(P＜0.01),模型组及细胞组Podocin蛋白的表达明显低于对照组(P＜0.01)。结论:(1)尾静脉注射胚胎后肾间充质干细胞可以降低ADN(微小病变型)大鼠的蛋白尿,减轻AND大鼠肾组织足细胞足突融合。(2)其可能的机制是通过上调Podocin、Nephrin两种蛋白的表达从而维持蛋白复合体的结构和功能的完整。