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目的: 研究表明肿瘤细胞中E-cadherin胞外域发生高度异常N-糖基化，抑制肿瘤细胞之间形成成熟的黏附连接，使肿瘤细胞的增殖侵袭能力增强。本课题通过基因转染提高肿瘤细胞连接的稳定性来抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭能力，其可能会成为肿瘤基因治疗的新思路。本课题的实验目的是通过低糖基化的E-cadherin质粒转染Ca127舌癌细胞研究转染质粒对肿瘤细胞的增殖和侵袭的影响及其发生机制。 方法: 1.用编码有Flag标签的低糖基化E-cadherin(V13)和野生型E-cadherin(E-cad)的质粒分别转染Ca127细胞。通过G418筛选获得转染成功的细胞，使用Westernblot检测外源性E-cadherin的表达。 2.通过CCK-8实验获得各组细胞生长曲线，检测不同组细胞的增殖能力。 3.通过单层细胞划痕愈合实验观察各组细胞迁移能力。 4.通过细胞体外侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力。 5.使用免疫沉淀法检测E-cadherins介导的AJs(adherensjunctions)复合体中的α-catenin、β-catenin、γ-catenin和vinculin的含量。 6.通过细胞免疫荧光实验检测各组细胞中E-cadherin的表达情况。 结果: 1.Westernblot结果显示:外源性编码E-cadherin的基因都有显著表达，低糖基化E-cadherin的分子量比野生型E-cadherin的分子量要小。 2.CCK-8结果显示:72h后，相对于对照组细胞和野生型E-cadherin转染组细胞，低糖基化E-cadherin转染组细胞OD值明显降低，差异具有显著性。 3.单层细胞划痕愈合实验结果显示:与野生型转染组和未转染组细胞相比，低糖基化组细胞的划痕关闭速度明显减慢，差异显著。 4.体外细胞侵袭实验结果表明:低糖基化组细胞侵袭能力比野生型转染细胞小，野生型转染组细胞比未转染组侵袭能力降低，差异显著。 5.免疫沉淀实验结果显示:与野生型转染组细胞相比，低糖基化组细胞的胞内域有更多的α-catenin、β-catenin、γ-catenin和vinculin与其相连接，黏附连接更稳定，两者之间的差异具有显著性。 6.细胞免疫荧光结果显示:对照组中E-cadherin弥散性表达于细胞质中，野生型组细胞E-cadherin在细胞膜有部分集中性表达，但是表达不连续，低糖基化组细胞中E-cadherin在细胞膜上的表达是集中并连续的。 结论: 低糖基化E-cadherin(V13)基因转染比野生型E-cadherin(E-cad)基因转染Cal27舌癌细胞更能显著抑制舌癌细胞体外的增殖和侵袭能力。其发生机理是可能是因为V13能形成更加稳定的细胞黏附连接，从而抑制了肿瘤细胞的增殖和侵袭。