丹参药材HPLC指纹图谱及其质量评价研究

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为加强丹参药材资源的综合开发利用与GAP基地丹参的质量控制,本研究以高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合多指标成分定量分析的方法,对不同部位、产地、生长时期以及不同根类型的丹参进行了综合系统的评价,同时分别建立了复方丹参滴丸和商洛基地丹参药材的标准指纹图谱,获得以下结论:1.指纹图谱方法学和稳定性研究本研究各种方法学指标均符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》,提取条件和色谱条件的微小变化对指纹图谱相似性的影响较小,所建立方法可用于建立丹参药材脂溶性成分和水溶性成分指纹图谱。2.复方丹参滴丸和商洛丹参药材指纹图谱研究采用共有模式生成法中的平均矢量法,分别建立了复方丹参滴丸标准指纹图谱和商洛GAP基地丹参药材标准指纹图谱,同时结合多指标成分定量分析法,发现仅以指纹图谱技术或单一成分含量分析不能准确反映中药质量,HPLC指纹图谱技术结合多指标成分定量分析法用于中药质量评价,结果更为可靠。3.不同产地丹参品质评价林芝丹参脂溶性成分含量较高,其中丹参酮ⅡA含量高达1.62%,是商洛丹参的5.47倍,水溶性有效成分种类较少,丹酚酸B含量较低,但5号峰成分的含量却是商洛丹参的9倍以上,推测可能是迷迭香酸,作为开发单一成分药物原药材,具有较高的利用价值。其他各产地丹参水溶性和脂溶性成分种类相同,指纹图谱相似,但品质以山东白花丹参最优,商洛紫花丹参与河北丹参次之,北京、安徽和江苏等地丹参质量较差。4.丹参有效成分分布规律和动态积累研究丹参脂溶性成分以丹参酮ⅡA为主,主要分布于根周皮部位,其他部位含量较微,紫花和白花丹参脂溶性成分的分布规律相同,但部分成分在白花丹参含量较高。水溶性成分以丹酚酸B为主,主要分布于根木薄壁细胞层和木部,但叶中丹参素分布较高,花瓣和花托中部分成分含量也较高,可用于单体化合物的提取和开发。两种丹参同一部位水溶性成分种类相同,但在含量上略有差异。从5月份到12月份,紫花和白花丹参脂溶性成出现了降升降升的变化规律,在8月份达到最高点,水溶性成分变化略有不同,但都在8月份达到积累高峰,10月份以后又有所回升。5.不同类型丹参根品质评价根腐病和线虫病为丹参常见病害,对丹参品质有重要影响。在脂溶性成分上,就整体相似性而言,以根腐病影响较大,就单个成分而言,根腐病能明显促进二氢丹参酮I和6号峰的积累,线虫病则能促进丹参酮IIA和7号峰的积累。在水溶性成分上,两种病害都降低了丹参品质,但以根腐病影响较大。不同根色丹参脂溶性成分差异较大,以棕红色丹参最好,褐色根中部分成分较高,而浅黄色根中脂溶性成分含量极微。水溶性成分也以棕红色最优,浅黄色丹参略有降低,褐色最差。比较了一年、两年和三年生丹参品质的差异,结果脂溶性成分并不是随着生长年限的增加而升高,两年生丹参各成分普遍较低,部分成分三年生较高,三个生长年限水溶性成分则相差不大,三年生丹参个别成分显著增加。以部位和根直径把商洛丹参分为7个组,分别为芦头、直径0.8cm以上、0.5-0.8cm、0.3-0.5cm、0.2-0.3cm、0.2cm以下干燥根和须根,以脂溶性成分评价,0.2cm以下丹参品质最优,为一级丹参,0.5-0.8cm为二级丹参,0.8cm以上和0.3-0.5cm段为三级丹参,0.2-0.3cm段和须根为四级丹参,芦头品质较差。以水溶性成分评价,直径越大,丹参品质越好,0.8cm以上为优质丹参(一级),0.2-0.8cm段为二级丹参,芦头和0.2cm以下丹参为三级丹参,须根品质较差,不可当作丹参使用。
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