骨形态发生蛋白对永生化成牙本质样细胞成骨分化作用的研究

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目的:研究永生化成牙本质样细胞(immortalized odontoblastlike cells,iODs)的间充质干细胞表型和骨形态发生蛋白(Bone m orphogenetic protein,BMP)-2,-4,-6,-7和-9对iODs成骨分化的作用。方法:使用iODs模拟成牙本质样细胞(Odontoblast-like cells,ODs)应用于实验。使用半定量RT-PCR(Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction)连续检测iODs中BMPs的内源性表达。使用MTT试剂盒检测iODs的增殖能力。通过流式细胞术分析iODs的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)表面标志物。重组腺病毒介导的BMP(Ad-BMP)和绿色荧光蛋白(Ad-Green Fluorescent Protein,Ad-GFP)转染iODs。在体外,使用半定量RT-PCR、碱性磷酸酶活性、茜素红染色及油红O染色测定检测iODs的成骨和成脂分化能力。最后,使用micro-CT和组织学分析评估了体内形成的异位矿化组织的体积和密度。结果使用单因素方差分析和Scheffe的多重比较检验进行分析。结果:iODs细胞株保持良好的增殖活性,表达间充质干细胞表面标志物并具有多向分化能力。相比BMP-4、-6和-7,BMP-2和BMP-9具有更强的介导iODs的成骨分化作用。结论:ODs和成骨生长因子(如BMP-2和BMP-9)可用作骨组织生物工程的有效策略。
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