药用植物广豆根组培快繁体系的建立

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广豆根,又名山豆根和苦豆根,是豆科(Leguminosae)槐属(Sophora L.)植物越南槐(Sophora tonkinensis Gapnep.)的干燥根与根茎,是资源紧缺而又极具发展前景的中药材。本研究以广豆根野生引种栽培苗为外植体,对广豆根进行组织培养,目的在于探索广豆根离体培养的有效途径以建立高效快速的繁殖体系,为保存其种质资源和扩大生产提供理论基础和技术支持,研究结果如下:1、广豆根组织培养最适宜的外植体类型为植株上部带腋芽的茎段,取材季节以3月上旬为佳,污染率较低且分化率高。2、广豆根外植体经75%酒精浸泡30s,无菌水清洗2次,再用0.1%升汞+吐温80灭菌8min,无菌水清洗3次,污染率低于10%。3、MS和B。为广豆根初代培养较适宜的基本培养基,NAA和6-BA是适宜广豆根初代培养的生长素和细胞分裂素,在MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.15mg/L的培养基中培养12d,腋芽开始萌发,培养30d,广豆根外植体腋芽的诱导率达93.33%。4、适宜广豆根继代培养的材料为顶芽,在培养基中添加植物天然提取物椰乳有利于促进不定芽的增殖,在MS+NAAO.25mg/L+6-BA2.5mg/L+20%椰乳培养基中培养30d,广豆根继代增殖倍数可达3.72。5、广豆根组织培养适宜的生根培养基为1/2MS基本培养基,在1/2MS+IBA1.5mg/L的培养基中培养30d后,广豆根组培苗的生根率可达91.6%,根数为5.33条,根长为4.56cm。广豆根组培苗最适宜的炼苗方式为松盖5d与开盖2d相结合,最适宜的移栽基质为珍珠岩:黄沙:泥炭为1:1:1,移栽40d后幼苗成活率达90.00%。6、半年生的广豆根组培苗与实生苗生物碱含量有所差异,实生苗的茎部、叶部苦参碱含量分别为组培苗的0.69倍和0.75倍,但实生苗各部位的氧化苦参碱含量和生物碱总量均高于组培苗。
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