1.应用锰离子增强MRI研究强迫游泳小鼠模型脑功能的改变;2.小鼠Fzd10多克隆抗体的制备及特异性鉴定

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主要研究内容包括两个部分,一部分为应用锰离子增强MRI研究强迫游泳小鼠模型脑功能的改变:另一部分是小鼠Fzd10多克隆抗体的制备及特异性鉴定。第一部分:应用锰离子增强MRI研究强迫游泳小鼠模型脑功能的改变   抑郁症是一种常见的精神疾病以情绪低落、兴趣减低、思维迟缓、缺乏主动性、反复自杀念头等为主要特征。目前抑郁症已成为危害人类健康的十大疾病之一。研究抑郁症的发病机制仍然是神经科学的热点之一,在整体水平了解大脑高级功能的变化显得尤为迫切。随着核磁共振成像技术的发展,最近发展起来的脑功能磁共振成像技术(fMRI)有助于我们在整体水平了解大脑的高级功能。在本实验中,我们利用锰离子增强MRI技术研究了强迫游泳抑郁小鼠模型的脑功能的改变。我们通过选择8只小鼠,把它们分成强迫游泳(FST)和对照两组,然后通过MEVMRI研究FST建立起来的绝望小鼠脑功能改变。MEMRI结果显示在FST刺激的小鼠脑的海马、纹状体(包括苍白球和尾状核)、下丘脑、丘脑、皮质等区域有异常的激活,这与人类任务态fMRI研究的结果有一定的相似性,同时在小脑也观察到有一定的激活区域。第二部分:小鼠Fzd10多克隆抗体的制备及特异性鉴定   Fzd10是Wnt受体之一,为跨膜七次的膜整合蛋白。小鼠Fzd10的原位杂交试验表明,Fzd10在E14.5-E16.5,特异性表达在Cortica1 hem,并在丘脑高表达。为了研究Fzd10基因功能也为深入研究Wnt信号通路在神经系统发育中的功能提供线索,我们希望制备Fzd110多克隆抗体。考虑Fzd10与Fzd蛋白其他家族的同源性,我们采取合成肽的方法制备Fzd10抗体。首先采用生物信息学的方法分析小鼠Fzd10蛋白的序列,获得并合成抗原肽,并使其与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)交联,再免疫新西兰大白兔。免疫组化表明抗体血清能在预期的E16.5小鼠胚胎的丘脑、fimbria标记Fzd10,但是同时在皮质区和海马区也有信号。说明抗体可能与Wnt的其他受体有交叉反应,后续实验需要进一步制各特异性更高的抗体。
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