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目的:通过体外及体内实验探讨早期糖尿病状态对于蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）表达的影响,以及PKC的激活与内皮素（endothelin,ET）系统、血-视网膜屏障（blood-retinal barrier,BRB）破坏的关系,并采用PKC抑制剂进行干预实验。 方法:采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）及链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的早期糖尿病大鼠模型,酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA）测定细胞膜和细胞浆PKC活性以及大鼠视网膜和玻璃体血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白的浓度,半定量逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）测定HUVEC细胞ET-1、VEGF mRNA和大鼠视网膜内ET-1、ET-3、受体ET-A和ET-B以及VEGF mRNA的表达,免疫细胞化学染色测定HUVEC细胞ET-1和VEGF的表达,免疫组织化学染色测定视网膜及视网膜血管组织内ET-1的表达,伊凡思蓝（Evans Blue,EB）作为示踪物定量测定大鼠BRB破坏,同时观测PKC抑制剂GF109203X对高糖培养基中的HUVEC细胞VEGF和ET-1 mRNA及蛋白表达的影响,并通过玻璃体内给予PKC抑制剂GF109203X后观测对糖尿病大鼠ET系统、VEGF以及BRB的影响。 结果:（1） 高糖培养基（含25 mM葡萄糖）中的HUVEC细胞较低糖培养基（含5.5 mM葡萄糖）中的HUVEC细胞膜PKC活性升高39%,而细胞浆PKC活性则无明显改变,且在将高糖培养基恢复至低糖培养基48 h后,HUVEC细胞膜PKC活性恢复正常;病程为2周的糖尿病大鼠视网膜内细胞膜PKC活性较正常组明显升高,达45%,而细胞浆PKC活性则无明显改变。（2） 高糖培养基中的HUVEC细胞随着培养时间的延长,ET-1 mRNA及蛋白的表达逐渐增强,至72 h达到高峰,其后逐渐下降;予以10-5、10-6、10-7M PKC抑制剂GF109203X后,HUVEC细胞ET-1 mRNA及蛋白水平较对照组明显下降,呈剂量依赖关系。糖尿病大鼠视网膜及视网膜血管组织内ET-1 mRNA及蛋白水平较正常组明显升高,而ET-3及受体ET-A和ET-B mRNA水平则无明显改变;糖尿病大鼠分别予以10-5、10-6、10-7M PKC抑制剂GF109203X玻璃体腔内注射后,视网膜内