【摘 要】
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盐和干旱胁迫严重的影响植物的生长发育,因此展开对植物抗旱分子机理的研究变得尤为重要。胡杨(Populus euphratica Olive.)是生长在干旱盐碱地的一种稀有珍贵的树种,也是我国
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盐和干旱胁迫严重的影响植物的生长发育,因此展开对植物抗旱分子机理的研究变得尤为重要。胡杨(Populus euphratica Olive.)是生长在干旱盐碱地的一种稀有珍贵的树种,也是我国西北部干旱盐碱区域的唯一一种能够长成高大乔木的树种。一些研究表明泛素化在植物胁迫响应中扮演着关键的角色。 本文以胡杨为材料,克隆了一个C端含有RING finger结构域的蛋白编码基因(152个氨基酸)PeRH2,并在烟草中过表达PeRH2,通过对转基因烟草的表型以及生理数据的分析,探讨了PeRH2在逆境胁迫中的作用,研究结果如下: 1.经过序列比对推断PeRH2编码泛素E3连接酶,属于RING finger家族中的RING-H2构型。 2.PeRH2响应渗透胁迫,胡杨苗木在255 mM甘露醇胁迫下,叶片PeRH2表达量上调。 3.在拟南芥原生质体中瞬时表达融合蛋白pYellow0029-PeRH2的研究表明,PeRH2蛋白定位于细胞核。 4.以农杆菌介导的叶盘法将PeRH2转入烟草,SqRT-PCR结果显示,PeRH2在转基因烟草中获得过表达。 5.用255 mM甘露醇处理8天后,转基因烟草幼苗的根长长于野生型和转空载体烟草,表明转基因烟草幼苗的耐受渗透胁迫的能力增强。将烟草干旱处理10天,发现野生型烟草和转空载体烟草叶片萎蔫,而转基因烟草叶片萎蔫的迹象不明显。复水恢复3天后,野生型烟草和转空载体烟草生长状态并没有明显改善,而转基因烟草恢复良好。生理数据分析显示,转基因烟草的叶片保水力明显高于野生型和转空载体烟草,而叶片相对电导率、MDA的含量则要明显低于野生型和转空载体烟草。实验结果说明PeRH2对胡杨抗渗透胁迫具有贡献,过表达PeRH2能够提高植物的抗旱能力。
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