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目的:观察针刺“长强”穴对自闭症模型大鼠学习功能、海马区Wnt通路上β-catenin和GSK-3β蛋白表达的影响
方法:(1)选健康成年Wistar雄性及雌性大鼠各10只,进行雌、雄合笼,随机分为2组,一组(A组)9对,另外一组(B组)1对,A组在怀孕12天时给予母鼠腹腔注射丙戊酸钠,是为模型组母鼠;其产下的仔鼠随机分为非针刺对照组10只、非穴治疗对照组10只、针刺“长强”穴组9只。治疗组以30号0.5寸毫针直刺约0.2寸,行平补平泻提插手法1分钟。每日针刺1次,10日为1疗程,疗程结束后休息2日后再针刺,连续针刺3个疗程。B组为1对,是为空白对照组母鼠。空白组母鼠产下的仔鼠标记为正常对照组。(2)治疗结束后行水迷宫实验检测,再开颅取材,行免疫组化技术检测β-catenin和GSK-3β蛋白阳性率表达。(3)水迷宫定位航行测试中大鼠逃避潜伏期和免疫组化数据均采用单因素方差分析。
结果:(1)水迷宫行为学观察:在水迷宫定位航行实验中,各组大鼠逃避潜伏期分别为:非针刺对照组(54.66±7.08)、非穴治疗对照组(46.84±7.08)、针刺“长强”穴组(44.18±6.88)、空白对照组(40.78±2.09)秒。其中针刺“长强”穴组与非针刺对照模型组相比,所用时间明显缩短(P<0.05);空白对照组与非针刺对照模型组比,所用时间缩短(P<0.05)。
(2)海马区β-catenin蛋白表达情况:各组大鼠海马区β-catenin蛋白表达阳性细胞率分别为:非针刺对照组(5.20±1.03)、非穴治疗对照组(4.20±1.48)、针刺“长强”穴组(3.11±1.05)、空白对照组(2.60±0.97)。其中针刺“长强”穴组与非针刺对照模型组相比,其阳性细胞率明显下调(P<0.05);空白对照组与非针刺对照模型组比,其阳性细胞率明显下调(P<0.05)。
(3)海马区GSK-3β蛋白表达情况:各组大鼠海马区GSK-3β蛋白表达阳性细胞率分别为:非针刺对照组(2.20±1.03)、非穴治疗对照组(3.80±0.63)、针刺“长强”穴组(4.88±1.45)、空白对照组(6.00±0.00)。其中针刺“长强”穴组与非针刺对照模型组相比,其阳性细胞率明显上调(P<0.05);空白对照组与非针刺对照模型组、非穴治疗组相比,其阳性细胞率明显上调(P<0.05)。
结论:针刺“长强”穴可通过调节Wnt通路上的β-catenin和GSK-3β蛋白产生影响进而提高自闭症模型大鼠学习能力。