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血小板活化因子(Platelet activating factor,PAF)是近年研究较活跃的细胞因子之一,它具有广泛的生物学活性,可诱导脑血栓形成,造成脑细胞缺血,促发脑细胞Ca内流,改变脑血流以及造成缺血区内的多种生理病理过程,包括兴奋性毒性、自由基、炎症反应及线粒体和DNA损伤可以触发细胞凋亡。随着我国经济发展和人们生活水平的提高以及人口的老龄化,脑血管病的发生率有增高的趋势。血小板活化因子(PAF)在缺血性心脏病、血栓形成等疾病中的作用国内外学者已有所研究。探讨PAF在脑血管病,尤其在脑缺血疾病中的生理学意义,可为脑血管病的防治开辟一个新的领域。为此,我们观察了 研究生学位论文 脑血管病患者PAF水平的动态变化,以期了解PAF在脑缺 血患者中的病理生理学意义。 资料和方法 一、研究对象 1、病例组:120例脑血管病患者均系1999年1月至 ”“年8 月间在浙江大学医学院附属第二医院神经内科 急诊及住院的病人,诊断标准按第四次全国脑血管病会议 制订的诊断标准并经头颅 CT或 MR证实,并删除了可能 影啊际F的其他同素,如台卉患有支气管哮7’克 糖尿病、 缺血性心脏病 旧有心绞痛、心肌梗死等病史)等,入选 脑缺血组病人43例,均在起病72小时内(急性期)和半 月后 广恢复期)各采静脉血1 次,其中男性25例,女性 旧 例,年龄抡 ~钻 岁,平均币 *8上*.7) 岁,另外对 其中7例(男4例、女3例)患者分别于起病的第1、3。 7、15、21、ZS R各采静脉血 1次并检测血中叩F的变化, 以其丛到动态观察的目的。脑出血组21例,男性12例, 女性9例,年龄41~79岁,平均仿1.3门.2)岁。 研究生学位论文 2、疾病对照组:即非脑血管病的其他神经系统疾病 的患者32例,其包括坐骨神经痛7例,颈椎病6例,急 性脊髓炎4例,吉兰-巴雷综合征6例,癫痈5例,原发 性帕金森氏病2例,痉挛性斜颈2例,其中男性16例, 女性16例,年龄41~77岁,平均“4.it10.9)岁。 3、健康对照组:均系健康体检者,排除其他可能影 响PAF的因素后入选46例,其中男性27例、女性19例. 年龄41~SO 岁,平均(6O.3士门.5)岁。 t 以上各组年龄经统计全检验,无显著性差异 (刘).05)。 二、实验方法 除健康对照组为相隔15天各采静脉血1次、其余各 组均在起病 72小时内(急性期)和 15天(恢复期)各采 静脉血l次。检测过程均在浙江大学医学院附属第二医院 消化实验室内进行,所有标本均能及时处理。PAF标准品 由美国 S i gma公司购得:硅胶 G由上海华美生物工程公司 主产。 PAF采用薄层层析法测定:首先采静脉血2毫升,立 研究生学位论文 即加入预冷的 3毫升氯仿和 6毫升甲醇试管中,混匀,12009 离心15分钟,取上清液与氯仿6毫升和甲醇9.6毫升混 匀,室温静置1小时,同上离心,取出下层氯仿相,37oC 水浴并氮气吹干(通风柜中操作八 取15克硅胶G加水调 至糊状,倾注平板(s-c20cm),120℃ 烘千120分钟,冷 却至室温备用。最后在离底部约11.scm处点样及标准品 (各 10VI),用氯仿:甲醇:水(65:35:6,V/V/V) 展开,展距约10、5cm,展毕凉干,以10%磷钥酸均匀喷 雾,80”C X 30分钟,直至斑点显蓝色,将与标准品盯值 ?目司的层祈带刮下,加,入0.*湖“土OUL g解,弃仇淀, 上清液比色定量。 结 果 一、脑缺血组、脑出血组的急性期和恢复期PAF水平 比非脑血管疾病组和健康对照组显著升高,而非脑血管疾 病组与健康对照组PAF水平无显著性差别。脑缺血组的急 性期PAF水平比恢复期明显升高,而脑出血和非脑血管疾 病组、健康对照组则无此改变。