组织蛋白酶B在颅内动脉瘤瘤壁的表达及其对瘤壁血管平滑肌细胞凋亡的影响

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目的观察颅内动脉瘤(IA)瘤壁的病理变化,检测组织蛋白酶B(CathepinB CatB)在颅内动瘤内的表达及其对瘤壁血管平滑肌细胞凋亡的作用,揭示颅内动脉瘤可能形成的机制。方法以20例显微手术切除的颅内动脉瘤标本为研究对象,同时取脑外伤后内减压术切除的正常脑皮层动脉血管6例作为对照,通过HE染色光镜下观察标本的病理变化,透射电镜了解其超微结构变化;应用免疫组化的方法检测标本中CatB,α平滑肌激动蛋白(a-SMA),半胱天冬酶-3(Caspase-3)的表达,并对染色的强度进行分级。通过实时定量PCR的方法检测标本内的CathepinB mRNA,α-SMAmRNA表达。结果(1)常规HE染色组织学观察颅内囊性动脉瘤瘤壁均已丧失正常脑动脉壁的三层结构,表现的基本组织病理变化为动脉瘤瘤壁均有的内皮细胞损伤,内皮细胞明显减少,甚至消失。内弹力层的崩解。中膜血管平滑肌细胞(VSMC)数量减少,被大量的纤维组织填充。部分动脉瘤瘤壁中有炎症细胞的浸润,同时在细胞集中区伴有数量不等的新生的营养血管。部分瘤壁上可观察到钙盐颗粒的沉积,血栓形成,以及动脉粥样硬化各阶段的病理改变(泡沫细胞的聚集,胆固醇结晶沉积,粥样斑块的形成)(2)投射电镜下的观察颅内动脉瘤瘤壁肌层较薄,可见VSMC明显减少,基质纤维断裂消失;部分VSMC核内见染色体边聚,核固缩,并有胞浆或胞核部分脱落或裂解成碎片,还有部分瘤壁可见典型的凋亡小体。(3)免疫组化结果动脉瘤组CatB表达指数高于对照组(260238.9士12343.5,199751.4士11129.1 P<0.05),动脉瘤组caspase-3表达高于对照组(14366.1士10641.6,78580士5941.3,p<0.05)而动脉瘤组a-sma表达低于对照组(174209.5士13596.4,236829.9士17981.3 p<0.05) Cathepin B与Caspase-3 ,α-SMA及动脉瘤的大小具有相关性,spearman秩和相关系数为0.82703, P<0.001,0.79844,P<0.001,0.7598,P<0.001均具有统计学意义,但与动脉瘤破裂与否;Hunt﹠Hess分级;血管痉挛程度无关。(4)实时定量PCR结果CatBmRNA在颅内动脉瘤的表达为对照组的3.80097倍,P=0.002221<0.01,具有统计学意义。α-SMA mRNA在颅内动脉瘤的表达为对照组的3.91倍,P=0.001854<0.01,具有统计学意义。结论1血管壁后天退行性改变可能在颅内动脉瘤的形成机制中起重要作用。2 Cathepin B在颅内动脉瘤壁的高表达,提示Cathepin B可能参与了颅内动脉瘤的形成机制。3 CathepinB在颅内动脉瘤壁的表达与颅内动脉瘤的大小有关,提示了其可能参与了颅内动脉瘤的生长机制。4 Cathepin B可能通过启动半胱天冬酶(Caspase)机制,诱导VSMC凋亡,导致颅内动脉瘤的形成与生长。
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