研究背景: 心肌肥厚(Cardiac hypertrophy，CH)是常见的心血管疾病临床症状，主要表现为心肌细胞肥大和间质成分的改变(或称为心脏重构)，心脏的顺应性和循环泵功能降低。 本实验就AMPK激动剂-AICAR(5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleoside)对由腹主动脉缩窄术(Transaortic constriction，TAC)造成大鼠CH的影响进行了研究，同时应用本实验室构建的携带AMPK的腺病毒载体转染体外培养的乳鼠心肌细胞，探讨了AMPK负性调节由血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激诱导心肌细胞肥大的可能机制及信号转导通路。 研究方法: 1.通过TAC建立大鼠CH模型，分为：假手术对照组(Sham)、假手术治疗组(Sham+AICAR)、CH对照组(TAC)、CH治疗组(TAC+AICAR)。术后24 h起经皮下注射AICAR(0.5 mg·kg-1·d-1)直至术后7周。CH对照组和假手术对照组在同样的时间皮下注射等量生理盐水直至术后7周。 2.术后7周，测量大鼠血压，多普勒超声仪测定(1)左室后壁舒张末期厚度(PWT)；(2)左室舒张、收缩末期内径(LVDD，LVSD)；(3)左室短轴缩短率(FS％)等指标判断CH程度及心功能状况；心肌组织HE染色，光镜观察及电镜观察病理学变化；按Nixion改良法，测定血清及心肌脂肪酸含量；RT-PCR检测肥大相关基因、PPARα mRNA的表达；Western blot检测PPARα蛋白的表达。 3.通过定向克隆和基因重组技术构建携带野生型AMPK基因的腺病毒载体，将此载体感染原代培养的心肌细胞，MTT检测细胞活力，RT-PCR及Western blot鉴定基因导入手段的有效性。 4.用Ang Ⅱ作为促心肌肥大刺激剂，以ANF、β-MHCmRNA表达水平、3H-亮氨酸掺入率及心肌细胞直径作为肥大指标，观察AMPK过度表达对心肌细胞肥大的影响；同时，通过Western blot检测MAPKs和磷酸化MAPKs蛋白表达，通过EMSA检测NF-κB DNA结合活性，明确Ang Ⅱ刺激后，AMPK过度表达对细胞内MAPKs及NF-κB信号通路的影响，初步探讨AMPK负性调节Ang Ⅱ诱导心肌肥大的可能机制。 结论: 1.活化的AMPK可抑制压力负荷增加引起的大鼠CH。 2.AMPK对压力负荷增加引起的大鼠CH的负性调节作用与其激活PPARα，并进而增强心肌脂肪酸利用有关。 3.AMPK在体外培养的心肌细胞中过度表达，可抑制由AngⅡ刺激引起的心肌细胞肥大性生长。 4.MAPKs及NF-κB信号通路参与AMPK对PPARα旺的调控，并进而参与AMPK对CH的抑制。