脊柱终板软骨的组织形态学观测及其在青少年特发性脊柱侧凸发病中的意义

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本文主要从以下几部分展开: 第一部分青少年特发性脊柱侧凸脊椎终板软骨的组织学形态 目的:观测青少年特发性脊柱侧凸者终板软骨的组织形态学特征,探讨其病因学意义。 方法:女性AIS患者20例,年龄10~17岁,平均14.4±1.6岁;取顶椎、端椎终板软骨分别20例。切片后HE染色,光镜下观察终板软骨组织形态;使用病理图像分析系统定量分析肥大区及增殖区的厚度、厚度的比值、细胞巢面积和平均细胞数、增殖区细胞数/视野(放大400倍)。 结果:1)终板软骨内有类似四肢长骨生长板样组织结构;2)顶椎凸/凹侧间,各观察指标前者大部分显著高于后者(P<0.01)。3) 端椎凸/凹侧间指标几乎无显著差异。4) 顶椎—端椎间同侧比较,凹侧肥大区细胞数、面积及凹侧增殖区细胞数在端椎显著大于顶椎(P<0.01)。5) 顶椎肥大区凸侧/凹侧的细胞数、厚度比值及增殖区凸侧的细胞数,FC(factor of curve—FC)>7组显著小于FC≤6组(P<0.01)。 结论:本组组织学变化倾向于机械应力作用下的继发性改变,但部分组织学变化与应力大小变化之间不完全平行,提示AIS的发生发展可能存在生物力学以外因素。 第二部分SOX9在青少年特发性脊柱侧凸终板软骨的表达及意义 目的:通过研究青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)者终板软骨的组织形态、软骨内成骨转录因子SOX9的表达,探讨SOX9在AIS发生发展中的意义。 方法:女性AIS患者12例,年龄12^-18岁,平均14.211.8岁;Risser分级0-4;取顶椎、端椎终板软骨分别12例。HE染色,光镜下观察顶椎、端椎终板软骨组织细胞形态;免疫组化观察SOX9于顶椎--凸/凹侧,端椎--凸/凹侧,凸侧--顶椎/端椎,凹侧--顶椎/端推间表达差异,观察指标为阳性细胞数( samples),累积光密度(integrated optical density,IOD). 结果:终板软骨有类似四肢长骨生长板样组织结构。顶推凸侧细胞活性强于凹侧,而在端椎该差异不明显。比较阳性细胞数(samples)和累积光密度〔IOD),顶椎凸侧显著大于凹侧(P<0.05 )端推凸/凹侧间无显著差异(P > 0.05 );顶椎一端椎间同侧比较两指标:凹侧阳性细胞数(samples)及累积光密度端椎均大于顶稚,其中阳性细胞数差异有统计学意义;凸侧阳性细胞数(samples)及累积光密度 (IOD)顶椎均高于端椎,但无显著统计学差异((P>0.05)。在肥大区,表达SOX9的阳性细胞数(Samples)和累积光密度(IOD)指标与肥大层厚度、细胞巢平均面积、平均细胞翔细胞巢均呈显著正相关(P < 0.05 )。而在增殖区,除Samples与增殖层厚度呈显著正相关(P<0.05)外,余相关性均不显著。 结论:本组AIS者终板软骨的组织形态学变化、SOX9的表达情况遵守Hueter-Volkmann定律,属于不同机械应力环境下继发性改变,在椎体终板局部由SOX9表达差异作为AIS的原发性触发因素的可能性不大。这些差异加速了AIS的脊柱不对称性生长,成为侧凸进展的病理因素。 第三部分SOX9, L-SOXS, SOX6, II型胶原在青少年特发性脊柱侧凸终板软骨的共表达 目的:通过研究青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)者终板软骨的组织形态、软骨内成骨转录因子SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的表达,探讨它们在AIS发生发展中的意义. 方法:女性AIS患者12例,年龄12^18岁,平均14.7 I .8岁;Risser分级。^-4:取顶椎、端推终板软骨分别12例。HE染色,光镜下观察顶椎、端椎终板软骨组织细胞形态:免疫组化观察SOX9, L-SOXS, SOX6及Il型胶原于顶椎凸/凹侧间表达差异,观察指标为阳性细胞数(Samples ),累积光密度(integrated opticaldensity,IOD)。 结果:终板软骨有类似四肢长骨箭板软骨样组织结构。顶椎凸侧细胞活性强于凹侧,而在端椎该差异不明显。免疫组织化学显示SOX9, L-SOXS, SOX6及11型胶原被表达的阳性细胞数(Samples),顶椎凸侧均显著大于凹侧(P<0.05 );累积光密度(IOD)凸侧均大于凹侧(p<0.05 ),除II型胶原外,差异均有显著性(p<0.05 )。表达强度大小顺序为:II型胶原>SOX9 > L-SOXS > SOX6。各测试对象间IOD指标的相关性系数r在0.64-0.98之间,假设}=0的可能性采用P值判定,均为p<0.05;各测试对象间Samples指标相关性系数r在0.46-0.91之间,P值均<0.05,表明:SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的表达具有明显的相关性。 结论:本组AIS者终板软骨的组织形态学变化及SOX9, L-SOXS, SOX6, II型胶原的表达情况遵守Huete:一Volkmann定律,倾向于不同机械应力环境下继发性改变:SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的表达具有明显的相关性。在椎体终板局部由SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的共表达异常触发AIS的可能性不大。
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