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本文主要从以下几部分展开:
第一部分青少年特发性脊柱侧凸脊椎终板软骨的组织学形态
目的:观测青少年特发性脊柱侧凸者终板软骨的组织形态学特征,探讨其病因学意义。
方法:女性AIS患者20例,年龄10~17岁,平均14.4±1.6岁;取顶椎、端椎终板软骨分别20例。切片后HE染色,光镜下观察终板软骨组织形态;使用病理图像分析系统定量分析肥大区及增殖区的厚度、厚度的比值、细胞巢面积和平均细胞数、增殖区细胞数/视野(放大400倍)。
结果:1)终板软骨内有类似四肢长骨生长板样组织结构;2)顶椎凸/凹侧间,各观察指标前者大部分显著高于后者(P<0.01)。3) 端椎凸/凹侧间指标几乎无显著差异。4) 顶椎—端椎间同侧比较,凹侧肥大区细胞数、面积及凹侧增殖区细胞数在端椎显著大于顶椎(P<0.01)。5) 顶椎肥大区凸侧/凹侧的细胞数、厚度比值及增殖区凸侧的细胞数,FC(factor of curve—FC)>7组显著小于FC≤6组(P<0.01)。
结论:本组组织学变化倾向于机械应力作用下的继发性改变,但部分组织学变化与应力大小变化之间不完全平行,提示AIS的发生发展可能存在生物力学以外因素。
第二部分SOX9在青少年特发性脊柱侧凸终板软骨的表达及意义
目的:通过研究青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)者终板软骨的组织形态、软骨内成骨转录因子SOX9的表达,探讨SOX9在AIS发生发展中的意义。
方法:女性AIS患者12例,年龄12^-18岁,平均14.211.8岁;Risser分级0-4;取顶椎、端椎终板软骨分别12例。HE染色,光镜下观察顶椎、端椎终板软骨组织细胞形态;免疫组化观察SOX9于顶椎--凸/凹侧,端椎--凸/凹侧,凸侧--顶椎/端椎,凹侧--顶椎/端推间表达差异,观察指标为阳性细胞数( samples),累积光密度(integrated optical density,IOD).
结果:终板软骨有类似四肢长骨生长板样组织结构。顶推凸侧细胞活性强于凹侧,而在端椎该差异不明显。比较阳性细胞数(samples)和累积光密度〔IOD),顶椎凸侧显著大于凹侧(P<0.05 )端推凸/凹侧间无显著差异(P > 0.05 );顶椎一端椎间同侧比较两指标:凹侧阳性细胞数(samples)及累积光密度端椎均大于顶稚,其中阳性细胞数差异有统计学意义;凸侧阳性细胞数(samples)及累积光密度 (IOD)顶椎均高于端椎,但无显著统计学差异((P>0.05)。在肥大区,表达SOX9的阳性细胞数(Samples)和累积光密度(IOD)指标与肥大层厚度、细胞巢平均面积、平均细胞翔细胞巢均呈显著正相关(P < 0.05 )。而在增殖区,除Samples与增殖层厚度呈显著正相关(P<0.05)外,余相关性均不显著。
结论:本组AIS者终板软骨的组织形态学变化、SOX9的表达情况遵守Hueter-Volkmann定律,属于不同机械应力环境下继发性改变,在椎体终板局部由SOX9表达差异作为AIS的原发性触发因素的可能性不大。这些差异加速了AIS的脊柱不对称性生长,成为侧凸进展的病理因素。
第三部分SOX9, L-SOXS, SOX6, II型胶原在青少年特发性脊柱侧凸终板软骨的共表达
目的:通过研究青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis, AIS)者终板软骨的组织形态、软骨内成骨转录因子SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的表达,探讨它们在AIS发生发展中的意义.
方法:女性AIS患者12例,年龄12^18岁,平均14.7 I .8岁;Risser分级。^-4:取顶椎、端推终板软骨分别12例。HE染色,光镜下观察顶椎、端椎终板软骨组织细胞形态:免疫组化观察SOX9, L-SOXS, SOX6及Il型胶原于顶椎凸/凹侧间表达差异,观察指标为阳性细胞数(Samples ),累积光密度(integrated opticaldensity,IOD)。
结果:终板软骨有类似四肢长骨箭板软骨样组织结构。顶椎凸侧细胞活性强于凹侧,而在端椎该差异不明显。免疫组织化学显示SOX9, L-SOXS, SOX6及11型胶原被表达的阳性细胞数(Samples),顶椎凸侧均显著大于凹侧(P<0.05 );累积光密度(IOD)凸侧均大于凹侧(p<0.05 ),除II型胶原外,差异均有显著性(p<0.05 )。表达强度大小顺序为:II型胶原>SOX9 > L-SOXS > SOX6。各测试对象间IOD指标的相关性系数r在0.64-0.98之间,假设}=0的可能性采用P值判定,均为p<0.05;各测试对象间Samples指标相关性系数r在0.46-0.91之间,P值均<0.05,表明:SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的表达具有明显的相关性。
结论:本组AIS者终板软骨的组织形态学变化及SOX9, L-SOXS, SOX6, II型胶原的表达情况遵守Huete:一Volkmann定律,倾向于不同机械应力环境下继发性改变:SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的表达具有明显的相关性。在椎体终板局部由SOX9, L-SOXS, SOX6及II型胶原的共表达异常触发AIS的可能性不大。