【摘 要】
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光温敏核雄性不育是一种非常复杂的光温生态现象,其发现能为更广泛地利用水稻亚种间杂交优势创造条件。研究表明,在水稻籼粳雄性杂种不育Sa座位的杂交分离群里中存在一个纯合
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光温敏核雄性不育是一种非常复杂的光温生态现象,其发现能为更广泛地利用水稻亚种间杂交优势创造条件。研究表明,在水稻籼粳雄性杂种不育Sa座位的杂交分离群里中存在一个纯合重组体G392S,其具有单座位隐性遗传控制的反光温敏雄性不育的特性,即低温条件下小穗不育,在高温条件下小穗可育。该特性是由SaF、SaM、ORF13三个基因相互作用引起的。本研究在此基础上,利用CRISPR/Cas9系统对水稻Sa座位控制的反温敏不育的分子机制进一步研究,主要结果如下:1通过在人工气候箱中设计自然条件下天气温度,明确G392S的转育温度。结果发现,当平均温度为30.6℃时,G392S的花粉育性得到恢复,当平均温度为31.83℃时,G392S的花粉育性得到明显恢复。2构建了三个基因的CRISPR/Cas9载体,并分别遗传转化G392S,获得了转基因阳性植株。3通过测序分析,获得了三个基因的纯合突变体,并在低温条件下观察了这些突变体的花粉和小穗育性,发现均恢复全可育,这些结果进一步完善了三基因/四元件控制的反温敏不育分子机制。4通过回交,将控制G392S反温敏特性的三个基因导入至多个优良籼稻品种的背景,获得了多个优良籼稻背景的反温敏不育系。本研究通过CRISPR/Cas9敲除技术进一步证实了Sa座位控制的反温敏不育的三基因/四元件遗传模型,并通过回交构建了多个籼型反温敏不育系。
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