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目的:1.在动物水平,观察理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对H22荷瘤小鼠皮下移植瘤及肺转移瘤生长的影响,并进一步观察冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对小鼠移植瘤内EMT相关因子表达的影响。2.在细胞水平,观察理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,利用中效原理法评估两药合用效果,并进一步观察理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对人肝癌细胞HepG2迁移、侵袭、粘附的影响,从EMT方面探讨其抑制肝癌转移的机制。方法:1.建立H22荷瘤小鼠模型,将小鼠分随机分为空白组、5-氟尿嘧啶组(5-FU组)、理冲汤加减方+5-FU组(中药+5-FU组)、理冲汤加减方组(中药组),给药14天后,观察理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对小鼠体重、肝癌皮下移植瘤、肺转移瘤的影响。2.RT-PCR、Western Blot法检测理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对小鼠肝癌皮下移植瘤EMT相关因子的影响。3.以人肝癌细胞HepG2为研究对象,用MTT法检测理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对其增值的影响,利用中效原理法评价理冲汤加减方与5-FU的相互作用。4.根据中效原理法得出合理的用药方案,确定理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用的给药浓度,并进一步观察在此给药浓度下理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对HepG2细胞迁移、侵袭、粘附的影响。5.RT-PCR、Western Blot法检测理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用对HepG2细胞EMT相关因子的影响。结果:1.建立H22荷瘤小鼠模型,通过比较各组小鼠的体重变化,发现单用5-FU时,小鼠体重下降最多,而理冲汤加减方与5-FU联用可以缓解其体重下降趋势;通过计算各组小鼠抑瘤率发现,与空白组比较,理冲汤加减方单用对H22,荷瘤小鼠抑瘤作用不明显(P>0.05),理冲汤加减方与5-FU联用和5-FU单用均能抑制H22荷瘤小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),但理冲汤加减方与5-FU联用的抑瘤效果优于5-FU单用(P<0.05);通过计算合并用药指数,显示理冲汤加减方与5-FU联用可以增强化疗药物的抑瘤作用;通过计算肺转移抑制率发现,在抑制肝癌转移作用上,理冲汤加减方+5-FU>5-FU>理冲汤加减方。2.通过RT-PCR、Western Blot法发现通过RT-PCR和Western Blot法发现理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用均能上调小鼠肝癌皮下移植瘤体内的E-cadherin(P<0.05),下调N-cadherin、Snail、Twist、Vimentin(P<0.05);其调节能力为理冲汤加减方+5-FU>5-FU>理冲汤加减方。3.以人肝癌细胞HepG2为研究对象,通过MTT法发现理冲汤加减方与5-FU联用和单独使用均能抑制HepG2细胞的增殖,其效应具有浓度依赖性和时间依赖性;通过中效原理法发现理冲汤加减方与5-FU联用可以在低剂量作用于HepG2细胞24h后发挥协同抗肿瘤增殖作用。4.通过细胞划痕实验、侵袭实验、粘附实验发现理冲汤加减方与5-FU联合及单独使用均能抑制HepG2细胞的迁移、侵袭和粘附能力(P<0.05),抑制效果为理冲汤加减方+5-FU>5-FU>理冲汤加减方(P<0.05)。5.通过RT-PCR和Western Blot法发现理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用均能上调人肝癌细胞HepG2内的E-cadherin(P<0.05),下调N-cadherin、Snail、Twist、Vimentin(P<0.05);其调节能力为理冲汤加减方+5-FU>5-FU>理冲汤加减方。结论:理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用均能抑制小鼠肝癌皮下移植瘤的生长和肺转移瘤的数量,且理冲汤加减方与5-FU联用的效果优于5-FU单用。理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用均能抑制小鼠皮下移植瘤的EMT相关因子的表达,且理冲汤加减方与5-FU联用的效果优于5-FU单用。理冲汤加减方与5-FU单独或联合使用均能抑制人肝癌细胞HepG2的增殖、迁移、侵袭和粘附能力,且理冲汤加减方与5-FU联用表现为协同增效作用。理冲汤加减方与5-FU单独或联用均能抑制肝癌细胞EMT相关因子的表达,且理冲汤加减方与5-FU联用的效果优于5-FU单用。本课题通过动物及细胞实验表明理冲汤加减方联合5-FU具有协同抑制肝癌生长转移的作用,其机制可能与抑制肝癌EMT有关。