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目的:本文通过对临床标本的检测和细胞实验,观察HBX、microRNA-155和PTEN/PI3K-AKT之间的关系,探索HBX激活microRNA-155对PTEN/PI3K-AKT通路作用的影响,研究HBX对肝癌作用的分子调控机制。方法:本研究收集了2013年10月至2015年8月在天津市第一中心医院肝胆外科治疗的HCC患者,这些患者均接受了肝癌切除并且被组织病理学证实。患者血清、癌、癌旁组织,以及50例经检测HBV阴性的正常人血清。在收集的95例肝癌患者中,其中HBV阳性56例,HBV阴性29例,HCV阳性10例(不纳入研究),并对临床资料进行回顾性分析。细胞实验部分选择SMCC-7721和HepG2两个细胞系,实验设立三个亚组:第一亚组为microRNA-155 mimics和inhibitor处理组,第二亚组为过表达HBX基因组,第三亚组在第二组的基础上用SiRNA敲低microRNA-155,实验干扰之后,各组之间均进行western blot,transwell小室实验,划痕试验,CCK8细胞增殖实验,EdU细胞增殖实验等进行检测,各组实验均重复3次,实验结束之后统计各组结果。结果:1.HBV阳性的肝癌患者microRNA-155表达量高于HBV阴性患者和对照组,按照TNM分期,HBV阳性Ⅲ和Ⅵ期患者的microRNA-155表达量高于Ⅰ和Ⅱ期患者。2.Western blot结果显示SMCC-7721 inhibitor组的PTEN、E-Cadherin蛋白的表达量高于inhibitor对照组,而AKT、N-Cadherin、CyclinD1、CyclinA1+A2的蛋白表达量低于阴性对照组;HepG2 mimics组的PTEN、E-Cadherin蛋白的表达量低于mimics阴性对照组,而AKT、N-Cadherin、CyclinD1、CyclinA1+A2的蛋白表达量明显高于阴性对照组。Transwell小室实验结果表明SMCC-7721 inhibitor组迁移细胞数量显著低于inhibitor阴性对照组迁移细胞数量;而HepG2 mimics组组迁移细胞数高于mimics阴性对照组迁移细胞数。划痕试验结果显示SMCC-7721 inhibitor组细胞迁移率低于inhibitor阴性对照组细胞迁移率;而HepG2 mimics组细胞迁移率明显高于mimics对照组细胞迁移率。CCK8结果显示SMCC-7721 inhibitor组细胞细胞增殖速度明显低于inhibitor阴性对照组;而HepG2 mimics组细胞细胞增殖速度明显高于mimics阴性对照组。EDU增殖实验结果表明SMCC-7721 inhibitor组细胞EDU阳性率明显低于inhibitor阴性对照组。而HepG2 mimics组细胞EDU阳性率明显高于mimics阴性对照组。3.Transwell小室实验结果表明SMCC-7721HBX组和HepG2HBX组迁移细胞数高于对照组迁移细胞数。划痕试验结果显示SMCC-7721-HBX组和HepG2-HBX组细胞迁移率低于阴性对照组细胞迁移率。CCK8结果显示SMCC-7721-HBX组和HepG2-HBX组细胞细胞增殖速度明显低于阴性对照组。EDU增殖实验结果表明SMCC-7721-HBX组和HepG2-HBX组细胞EDU阳性率明显高于阴性对照组。4.Western blot结果显示SMCC-7721 HBX和HepG2 HBX SiRNA组的E-Cadherin蛋白的表达量高于对照组,而N-Cadherin、CyclinD1、CyclinA1+A2的蛋白表达量低于对照组。Transwell小室实验结果表明SMCC-7721 HBX和HepG2 HBX SiRNA组迁移细胞数低于阴性对照组迁移细胞数。划痕试验结果显示SMCC-7721 HBX和HepG2 HBX SiRNA组细胞迁移率低于对照组细胞迁移率。CCK8结果显示SMCC-7721 HBX和HepG2 HBX SiRNA组细胞细胞增殖速度明显低于对照组。EDU增殖实验结果表明SMCC-7721 HBX和HepG2 HBX SiRNA组细胞EDU阳性率明显低于对照组。结论:1.患者microRNA-155的相对表达量和乙肝阳性密切相关。2.microRNA-155通过抑制PTEN表达来促进细胞侵袭和细胞增殖。3.过表达HBX可以促进microRNA-155的表达,从而促进细胞侵袭和细胞增殖。4.敲低microRNA-155可以抑制细胞的侵袭和细胞增殖。5.HBX可激活microRNA-155来抑制PTEN从而促进肝癌的恶性转化作用。