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目的:观察HER2基因是否通过PI3K/AKT信号通路影响恶性脑膜瘤细胞的增殖、迁移。方法:1、经病毒感染分别将沉默和过表达HER2基因质粒转染至恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞株中。实验分为五组:第一组:空白组(Blank);第二组:沉默阴性对照组(NC-sh);第三组:沉默HER2基因组(HER2-sh);第四组:过表达阴性对照组(NC-ox);第五组:过表达HER2基因组(HER2-ox)。应用q-PCR和Werstern blot检测各组细胞HER2 m RNA和蛋白表达水平。2、CCK8法检测各组细胞的生长增殖情况;Transwell小室迁移法检测各组细胞迁移能力;流式细胞术检测各组细胞周期变化。3、Western blot检测各组细胞HER2、PI3K、AKT、P-AKT、m TOR、P-m TOR、S6、P-S6、NF-κB、Cyclin D1、VEGF蛋白的表达。4、用PI3K抑制剂LY294002、m TOR抑制剂KU0063794不同浓度(终浓度为20、60、100、5、10、20μmol/L)的培养液24、48、72h后,CCK8、Transwell小室迁移实验检测恶性脑膜瘤细胞增殖、迁移情况,用流式细胞术分析恶性脑膜瘤周期情况改变;Westen blot检测各组HER2、PI3K、AKT、P-AKT、m TOR、P-m TOR、S6、P-S6、NF-κB、Cyclin D1、VEGF蛋白表达的变化。结果:1、慢病毒转染成功,HER2在m RNA和蛋白水平已达到分组要求。2、沉默HER2基因组细胞的增殖能力减弱,迁移能力降低;过表达HER2基因组细胞的增殖能力增强,迁移能力提高。HER2基因通过影响细胞周期中的G0/G1-S的变化而起作用。3、沉默和过表达HER2基因可影响恶性脑膜瘤细胞中PI3K/AKT信号通路PI3K、P-AKT、m TOR、P-m TOR、P-S6、NF-κB、Cyclin D1蛋白的表达,差异有统计学意义,但对AKT、S6、VEGF蛋白的表达影响不大,差异无统计学意义。4、加入PI3K抑制剂LY294002、m TOR抑制剂KU0063794(终浓度为20、60、100、5、10、20μmol/L)的培养液24、48、72h后,运用CCK8检测各组细胞不同培养时间的增殖情况,选出PI3K抑制剂LY294002的最佳抑制浓度及作用时间为100μmol/L 24h、m TOR抑制剂KU0063794的最佳抑制浓度及作用时间为20μmol/L 24h;LY294002、KU0063794不同抑制浓度作用各组细胞24h后迁移能力降低;LY294002、KU0063794影响细胞周期中的G0/G1-S的变化而起作用;LY294002不同抑制浓度作用各组细胞24h后恶性脑膜瘤细胞中PI3K信号通路中HER2、PI3K、p-AKT、m TOR、P-m TOR、S6、P-S6、NF-κB、cyclin D1、VEGF蛋白表达随着抑制剂浓度的增加而降低,对AKT、m TOR蛋白表达影响不大;KU0063794不同抑制浓度作用各组细胞24h后恶性脑膜瘤细胞中PI3K信号通路中HER2、PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR、S6、P-S6、NF-κB、Cyclin D1、VEGF蛋白表达随着抑制剂浓度的增加而降低。结论:1、HER2可促进恶性脑膜瘤细胞的增殖和迁移;2、HER2基因可能通过PI3K/AKT信号通路促进恶性脑膜瘤细胞的生长、迁移能力。