对映体过量值测定的速差电泳法的开发

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近年来,毛细管电泳法成为手性物质对映体对映体过量值测定的常用方法之一,在毛细管电泳方法中,手性拆分剂的选择极其重要,手性拆分剂必须能确保手性物质有足够大的分离度,从而测定手性物质的对映体过量值。然而手性拆分剂的应用范围较窄,尽管市售拆分剂种类不断增多,但是仍旧满足不了对映体过量值测定的需要。此外,手性拆分剂的选择是个费时费力的过程,所以,为了增大手性拆分剂的应用范围并简化实验方法,我们设计开发了新型毛细管电泳速差(Velociy Gap,VG)方法,此设计方法是利用三电极电源构建出两个不同强度的连续电场,通过改变电场强度将样品分成两部分,从而降低手性物质中两异构体的比例及样品的浓度,从而降低样品的纵向扩散进而使样品达到基线分离,并计算出相应的对映体过量值,并同传统毛细管电泳进行了比较。本实验以苯磺酸氨氯地平(R:S=1:100)和盐酸氧氟沙星(R:S=1:51)为例,证明了此方法的可行性,且测得两样品的对映体过量值为(98.13±0.18)%和(96.19±0.15)%实验中首先对待测样品的分离条件进行优化,从而确定最优分离条件,分离条件大致包括手性拆分剂类型及浓度,缓冲溶液离子强度及pH,分离电压和有机溶剂类型和浓度。此外,我们通过加入内标物二苯胍,使所开发方法的操作更加精准。为了确定此方法的重现性,我们以另外两组苯磺酸氨氯地平(R:S=1:35,1:125)为例,平行测定三次,得其对映体过量值分别(94.33±0.16)%,(98.33±0.13)%,且测定结果的RSD均不大于0.2%。最后我们利用此方法测得市售施慧达苯磺酸氨氯地平的对映体过量值为(99.4±0.2)%,并与圆二色光谱法进行了比较。实验结果表明此方法既能简化对映体过量值方法的建立,又能增大手性拆分剂的使用范围。
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