峨眉双蝴蝶提取物抑菌及抗蛇毒功能研究

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为了探讨峨眉双蝴蝶的药用价值,本文运用滤纸片扩散法研究峨眉双蝴蝶提取物对致病菌的抑菌作用;通过体外解毒实验研究了峨眉双蝴蝶提取物对竹叶青、银环蛇蛇毒蛋白质水解酶、精氨酸酯酶、磷脂酶A2酶、L-氨基酸氧化酶、乙酰胆碱酯酶等的抑制作用;采用单次给药及连续灌药两种方式研究峨眉双蝴蝶提取物对小鼠注射竹叶青、银环蛇蛇毒后的保护作用。主要研究结果如下:1、峨眉双蝴蝶提取物抑菌作用的研究运用滤纸片扩散法,比较了峨眉双蝴蝶提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、福氏痢疾杆菌、表面金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、异型枸椽酸杆菌等6种致病菌的抑制作用,发现峨眉双蝴蝶提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、福氏痢疾杆菌、表面金黄色葡萄球菌都具有比较好的抑菌作用,抑菌圈直径分别达到42.5、26.4、24.3、35.1mm,对乙型溶血性链球菌和异型枸橼酸杆菌的抑制效果较差,没有明显的抑菌圈出现。通过对水提取物浸膏的系统分离之后再采用滤纸片法分别进行抑制金黄色葡萄球菌的实验,发现各组分都有抑菌效果,且没有哪个组分特别强。采用倍数稀释法研究峨眉双蝴蝶提取物对金黄色葡萄球菌的抑制效果,发现峨眉双蝴蝶提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为3.125%,与青霉素溶液标准曲线对照,测得峨眉双蝴蝶提取物的抑菌效价相当于0.77 U/ml,即61.72 U/mg。2、峨眉双蝴蝶水提物抗竹叶青、银环蛇蛇毒的研究体外解毒实验研究结果表明,峨眉双蝴蝶提取物对竹叶青、银环蛇蛇毒蛋白质水解酶、精氨酸酯酶、磷脂酶A2酶、L-氨基酸氧化酶、乙酰胆碱酯酶等都具有比较强的抑制作用,其抑制作用与峨眉双蝴蝶提取物的浓度成正向关系,尤其在峨眉双蝴蝶提取物质量和蛇毒质量为1:1时,这些酶的活性接近完全抑制。峨眉双蝴蝶水提物小白鼠急性毒性实验显示,最大剂量连续给药实验7天后,给药组无一只动物死亡,解剖亦未见器官异常。峨眉双蝴蝶水提物对注射竹叶青蛇毒的小鼠存活具有保护作用,低、中、高剂量组的保护率分别为6.6%、33.3%、60%,连续灌药时,低、中、高剂量组的保护率分别为40%、53.3%、66.6%。峨眉双蝴蝶水提物对注射银环蛇蛇毒的小鼠存活的保护作用,低、中、高剂量组的保护率分别为6.6%、46.7%、66.7%,连续灌药时,低、中、高剂量组的保护率分别为40%、60%、73.3%。通过萃取分离、硅胶薄层层析分离及HPLC制备分离,对峨眉双蝴蝶水提物进行分离及活性跟踪,发现两个纯物质对竹叶青蛇毒具有较好的抗性。
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