扶正祛邪微化疗法治疗老年急性髓系白血病的临床与实验研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a62058803
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目的:1)评价扶正祛邪微化疗法治疗老年AML的中西医疗效、缓解肿瘤负荷作用及其临床安全性。2)通过扶正祛邪方作用于HL-60、THP-1两种不同类型的白血病细胞株,探讨扶正祛邪方治疗AML的可能作用机制。方法:1)收集45例符合入组标准的老年AML患者,按不同治疗方法2:1比例随机分为两组,即联合化疗组(扶正祛邪复方联合微化疗)30例,单纯化疗组(单纯微化疗)15例。分析比较两组患者治疗前后西医缓解率、中医症候量化积分、中医疗效、外周血象、β2-微球蛋白(β2-MG)、乳酸脱氢酶(LDH)、输血量、生活质量评分、不良反应发生率的差异。2)将扶正祛邪复方作用于HL-60、THP-1两种不同类型的白血病细胞株,镜下观察两种不同类型的白血病细胞的形态变化;台盼蓝染色法、CCK-8法检测白血病细胞活性与增殖抑制率;流式检测细胞周期、凋亡;PCR、Western Blot检测相关凋亡基因在m RNA及蛋白不同层面上的水平。结果:1.扶正祛邪微化疗法治疗老年AML的临床评价研究:1)一般资料:两组治疗前患者性别、年龄、年龄分层及诊断分型等基线资料比较,差异均不具有统计学意义,表明两组患者之间基本情况具有均衡性,数据具有一定的可比性(P>0.05)。2)西医疗效:联合化疗组获完全缓解12人、部分缓解13人、未缓解NR 5人,总有效率为83.3%;单纯化疗组获CR 5人、PR 3人,NR 7人,总有效率为53.3%,联合化疗组西医疗效明显高于单纯化疗组(P<0.05)。3)中医证候积分的比较:两组治疗前后相比,中医证候总积分均较治疗前有不同程度的下降,联合化疗组与单纯化疗组相比,更能明显地降低中医证候积分,中医临床效果更明显,这体现在改善患者的发热、乏力、瘀斑、头晕、纳差方面的症状(P<0.05)。4)中医证候疗效:两组之间中医证候疗效比较,联合化疗组显效共6例,有效为21例,无效为3例,总有效率为90%;单纯化疗组显效共1例,有效为8例,无效为6例,总有效率为60%。联合化疗组在中医疗效方面作用效果优于单纯化疗组,且具有统计学差异(P<0.05)。5)外周血象:治疗前两组之间比较,外周血象各个指标均无统计学差异(P>0.05),数据具有可比性;两组进行治疗前后组内比较,均表现为治疗前后WBC、Hb、PLT比较具有统计学差异(P<0.05),其中联合化疗组白细胞由10.35±3.23(×10~9)降低到5.63±1.77(×10~9),Hb由47.84±24.64(g/L)上升到68.13±23.31(g/L);PLT由39.32±12.72(×10~9)上升到50.45±11.55(×10~9)。单纯化疗组白细胞由9.74±3.41(×10~9)降低到6.62±2.33(×10~9),Hb由51.63±21.50(g/L)上升到62.47±19.77(g/L);PLT由37.32±11.69(×10~9)上升到43.29±10.04(×10~9)。两组治疗后进行比较,数据结果具有统计学差异(P<0.05),说明扶正祛邪联合微化疗对血象的改善方面疗效优于单纯微化疗。6)肿瘤负荷指标:两组治疗前血清LDH、β2-MG的表达数值具有可比性,差异无统计学差异(P>0.05)。两组进行治疗前后组内血清LDH比较,结果显示两组在治疗后均可以降低LDH、β2-MG的表达,且差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后两组相比,差异不具有统计学意义(P>0.05)。说明两组在降低LDH、β2-MG方面均有一定疗效,但基本作用在统计学意义上无差别,作用相当。7)输血量的比较:两组相比,联合化疗组较单纯化疗组,更能降低红细胞与血小板的输注量(P<0.05)。8)生活质量评分:联合化疗组在生活质量提高方面明显优于单纯化疗组(P<0.05)。9)不良反应:联合化疗组在消化道及肾脏损害方面不良反应发生率明显低于单纯化疗组(P<0.05)2.扶正祛邪复方治疗急性髓系白血病的实验研究:1)台盼蓝染色后细胞形态的变化:不同浓度扶正祛邪复方干预HL-60、THP-1后,被台盼蓝染色的死细胞逐渐增多,说明扶正祛邪复方可以促进HL-60、THP-1凋亡,并有一定的浓度依赖性。2)台盼蓝染色细胞计数法检测增殖抑制率:结果显示扶正祛邪复方能抑制HL-60、THP-1细胞增殖,且呈一定的浓度与时间的依赖性(P<0.05)。3)CCK-8法检测增殖抑制率:结果显示扶正祛邪复方能够抑制HL-60、THP-1的增殖,且呈一定的浓度与时间的依赖性(P<0.05)。4)对白血病细胞的周期影响:与空白组比较,复方中药组可将HL-60、THP-1白血病细胞周期阻滞于G1期,S期的细胞比例减少(P<0.05),并且随着浓度的增高,对其周期的阻滞作用越强。5)对白血病细胞凋亡的影响:与空白组比较,扶正祛邪复方不同浓度组均可以诱导HL-60、THP-1白血病细胞发生凋亡(P<0.05),且呈一定的浓度与时间的依赖性。6)凋亡相关基因的蛋白表达:与空白组相比,20mg/ml浓度的扶正祛邪方在不同时间点均可以升高HL-60、THP-1细胞的Bax、P53、caspase-3蛋白的表达,同时降低Bcl-2的表达,结果具有统计学意义(P<0.05)。7)凋亡相关基因的m RNA表达:与空白组相比,20mg/ml浓度的扶正祛邪复方在不同时间点均可以升高HL-60、THP-1细胞的Bax、P53、caspase-3的m RNA表达,同时降低Bcl-2的m RNA表达,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正祛邪微化疗方案治疗老年AML疗效良好,能够提高患者缓解率,改善外周血象,降低肿瘤负荷作用,在减少各种不良反应、降低中医证候积分、提高中医证候疗效、减少输血量、改善患者生活质量等方面明显优于单用微化疗;扶正祛邪复方可以抑制白血病细胞HL-60、THP-1的增殖、生长,调控细胞周期,并能促进白血病细胞HL-60、THP-1的凋亡,推测扶正祛邪复方治疗老年AML的部分作用机制是通过提高Bax、caspase-3、P53的表达,降低Bcl-2的表达,抑制白血病细胞的增殖、生长、阻滞周期、诱导凋亡,从而发挥治疗作用。
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