羊驼(Vicugna pacos)肠道菌群分析及定量的初步研究

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羊驼(Vicugna pacos),属哺乳纲,偶蹄目,主要分布于南美洲秘鲁、玻利维亚和智利的安第斯山脉和阿尔卑斯山脉等高地国家。羊驼绒毛被称为软黄金,是高档纺织品原材料,同时羊驼肉、羊驼奶都有很高的价值。总的来说羊驼是一种毛肉兼用型、高经济价值的特种动物,可以带动当地旅游业的发展。我国于2002 年由董常生从澳大利亚引进羊驼进行研究,并成立中华羊驼基地。近些年来我国羊驼产业逐步发展,慢慢变成我国特种饲养的新兴支柱产业之一。肠道微生物菌群与宿主健康息息相关,它对宿主食物的消化、本身的代谢、抵御致病菌的入侵等起着不可替代的作用。本文以羊驼粪便为材料,研究了羊驼肠道菌群构成,并对比了不同生长期及不同生理时期羊驼肠道菌群的差异,主要研究结果如下:  基于16S rDNA的 V3-V4区高通量测序方法分析羊驼肠道菌群结构及多样性特点,结果显示,羊驼肠道菌群组成上分布最多的是厚壁菌门( Firmicutes ),其次是拟杆菌门(Bacteroidete),疣微菌门(verrucomicrobia),变形菌门(Proteobacteria),小羊驼相较成年羊驼,变形菌门(Proteobacteria),疣微菌门(verrucomicrobia),拟杆菌门(Bacteroidete)这三种细菌所占比例高。小羊驼和成年羊驼肠道菌群在属水平分类上有显著差异,小羊驼的前五种主要细菌为嗜黏蛋白阿克曼氏菌属( Akkermansia ),大肠杆菌志贺氏菌属(Escherichia/Shigella),梭状芽胞杆菌属XIVa(Clostridium XlVa),摩根菌属(Morganella),布劳特氏菌属(Blautia),而成年羊驼的菌群组成则相对稳定,与性别、是否怀孕相关性不大。  运用特异性引物检测羊驼肠道拟杆菌、梭菌、韦荣球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌 7种细菌,发现1d 的羊驼肠道没有这7 种菌,7 d 和14 d有亮度很低的拟杆菌、梭菌和肠球菌特异性引物的扩增条带,2 1d和2 8d可以检测到全部7 种细菌的存在。  实时荧光定量PCR检测不同生长阶段及生理时期羊驼肠道肠球菌、梭菌和拟杆菌结果显示,幼驼肠道中梭菌含量比公羊驼、空怀羊驼、妊娠羊驼低,差异达到极显著水平(P<0.01),妊娠羊驼肠道中的拟杆菌含量高于公羊驼和空怀羊驼(P<0.05)。28 日龄内,随着羊驼日龄增长,羊驼肠道肠球菌、梭菌和拟杆菌含量升高。28 日龄内,同一日龄羊驼肠道菌群存在差异,幼驼7d 时,肠道梭菌含量低于肠球菌和拟杆菌(P<0.05),肠球菌和拟杆菌差异不显著;14d 时,肠球菌含量极显著高于梭菌(P<0.01),拟杆菌含量显著高于梭菌(P<0.05),肠球菌和拟杆菌差异不显著;21d 时,肠球菌含量极显著高于梭菌和拟杆菌(P<0. 01),拟杆菌含量高于梭菌,达到显著水平(P<0.05);28d时,肠道中肠球菌高于梭菌、拟杆菌,差异达到极显著水平(P<0.01),拟杆菌和梭菌相比差异不显著。
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