IL-21在鸵鸟免疫器官发育中的变化规律研究

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鸵鸟浑身都是宝,饲养价值很高。3月龄前的雏鸵鸟因为正处于生长期,各器官系统尚未发育完全,容易受到各种致病因子的侵袭,从而诱发疾病,影响其健康生长。免疫器官是机体抵抗外部致病因子的重要屏障,其功能的发挥是通过T、B细胞起作用,免疫器官的发育程度决定了机体对疾病的抵抗能力。鸵鸟的育雏期时间较长,在此段时间内,鸵鸟生长发育较快,很容易受到外界各种致病因子的侵袭。为了提高鸵鸟育雏的成活率,减少此期疾病的发生,相关学者已经进行了大量的研究。但迄今为止,尚未见有关鸵鸟免疫器官发育规律的报道。   IL-21是在2000年由美国华盛顿大学的Parrish Novak等人首次发现的一种新型细胞因子,其主要由活化的CD4+T、NKT等细胞分泌,它能调节T、B和NK细胞的功能,并在调节B细胞产生免疫球蛋白中起主导作用。目前国内外对IL-21的研究主要集中在IL-21与相关疾病方面,但对IL-21在鸵鸟免疫器官中的分布及其随日龄的变化规律尚未见报道。   综合以上原因,本课题采用HE染色及免疫组织化学定位表达(SABC)技术,对鸵鸟免疫器官的组织形态结构及发育变化规律、IL-21在免疫器官中的分布及变化规律进行研究,以期为鸵鸟的疾病预防及治疗提供理论依据。   首先,研究了鸵鸟免疫器官的组织学变化规律。本试验以1d、30d、60d、90d及334d的健康鸵鸟作为试验对象,采用石蜡切片、HE染色,对鸵鸟的胸腺、脾脏和法氏囊的组织学结构及增龄性变化规律进行了研究。试验结果表明:胸腺的皮质与髓质面积比例随日龄增加逐渐降低;在胸腺髓质中观察到了3种形态的胸腺小体,依次为单细胞小体、同心圆小体和团块状小体,单细胞小体出现较早,可能与胸腺细胞的发育相关,同心圆小体和团块状小体出现较晚,可能与胸腺细胞的凋亡相关。脾脏的被膜厚度随日龄增长而明显增宽,在334d被膜厚度达到最大值;ld的脾脏中可见动脉周围淋巴鞘及椭球,并且动脉周围淋巴鞘和椭球面积随日龄增加明显增大:30d的脾脏中可见脾小结,并且脾小结的数量随日龄的增大而增多。腔上囊小结面积及其髓质面积随日龄增加而增大,囊小结皮质厚度随日龄增加先增大后减小。黏膜固有层的疏松结缔组织随日龄增长有向囊小结髓质中转移的趋势,334d的囊小结髓质基本被疏松结缔组织填充,说明法氏囊的功能已减退,法氏囊已经开始走向退化萎缩。   其次,研究了IL-21在鸵鸟免疫器官内的分布及增龄性变化规律。本研究以1d、15d、30d、45d、60d、75d、90d及334d健康鸵鸟为试验对象,采用石蜡切片、免疫组织化学技术对鸵鸟免疫器官内IL-21阳性细胞的形态学特点、分布及发育变化规律进行了研究。试验结果表明:IL-21阳性细胞在胸腺中呈圆形及卵圆形,主要分布于胸腺髓质,在皮质及皮质与髓质交界处也有分布;IL-21在胸腺中的表达强度和阳性细胞数量随日龄增长先逐渐上升后下降,在75d达表达强度和阳性细胞数均达最大值。IL-21在脾脏中的阳性细胞主要分布于动脉周围淋巴鞘及椭球周围淋巴鞘周围,且其表达强度及阳性细胞数也随日龄增长先上升后下降,并在90d达到峰值。与胸腺及脾脏相比,IL-21在腔上囊中的表达强度和阳性细胞数均较低,其阳性细胞主要表达于黏膜固有层,且其阳性细胞表达强度随日龄增长也先增加后降低,在90d达到峰值。以上结果表明,IL-21在鸵鸟的胸腺、法氏囊、脾脏中均有分布,说明其有可能还参与先天性免疫向获得性免疫的转换;且其随日龄变化呈现一定的规律性,基本上是在1到90d IL-21表达强度及表达量随日龄的增加而逐渐上升,根据这些变化可以推论出IL-21可能参与T、B细胞的增殖与分化,诱导T、B细胞的凋亡,从而对免疫器官的发育发挥重要作用。
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