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目的:通过观察电针“嗅三针”干预对帕金森小鼠行为学、嗅粘膜形态学及黑质TH表达的影响,以期初步阐明电针“嗅三针”对帕金森病的干预效应是通过改善小鼠嗅觉障碍而发挥作用。 方法:选用健康雄性10月龄KM小鼠40只,清洁级饲养,自由饮食1周后,随机分为正常对照组(control),帕金森模型组(Model),嗅三针干预组(XSZ),左旋多巴组(L-DOPA),每组10只。除正常对照组外,其余各组均用经鼻灌注LPS的方法建立帕金森模型,造模结束后电针干预4个疗程,疗程结束后先进行行为学测试,之后实施组织取材。用免疫组织化学法观察嗅粘膜形态及黑质TH的病理变化,免疫印迹法测定黑质中TH的表达水平。 结果:1.行为学:①与正常对照组相比,LPS组与左旋多巴组小鼠找寻食物的时间均超过300秒,具有显著性差异(P<0.01),可以判定为嗅觉功能减退或丧失。与LPS组比较,“嗅三针”干预组小鼠找寻时间减少,具有显著性差异(P<0.01);而左旋多巴组小鼠找寻时间仍然大于300秒,嗅觉功能障碍没有得到改善;②PD模型组在10min内的旋转环数明显高于正常对照组,差异有显著性(p<0.01),悬挂和爬杆实验时间较正常对照组少,差异有显著性意义(p<0.05)。“嗅三针”组在三个测试实验中的结果与模型组有显著性差异(p<0.05),结果显示嗅三针干预组对运动症状有良好的调节作用。 2.嗅粘膜形态学:PD模型组表现出粘膜层增厚,纤毛细胞化生,部分细胞空泡化、粘膜脱落,粘膜层、粘膜下层和固有层均可见有较多的炎性细胞浸润,固有层水肿,与正常组小鼠比较有极显著性差异(P<0.05);“嗅三针”干预组粘膜细胞总体排列整齐,偶见上皮细胞脱落及杯状细胞增生,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);左旋多巴组可见粘膜下层和固有层有较多炎症细胞浸润,与模型组比较无显著性差异。 3.免疫组化法:模型组黑质中TH阳性表达均显著低于正常对照组(P<0.05),电针嗅三针组提高了TH在中脑黑质中的表达(P<0.05),左旋多巴组与电针组效果相当,与PD模型组相比具有显著性差异(P<0.05)。 4.免疫印迹法:模型组和正常对照组比较,中脑黑质中TH蛋白的表达显著低于空白对照组(P<0.05),“嗅三针”组则显著提高了TH在中脑黑质组织中的表达(P<0.05),左旋多巴组也显著提高了TH的表达,相比于PD模型组具有显著性差异(P<0.05)。 结论:针刺“嗅三针”可以改善PD小鼠的行为学功能障碍,其机制可能是通过改善嗅粘膜及增加TH在黑质的表达而实现的。