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目的:亚临床甲状腺功能减退症（亚临床甲减）是最常见的妊娠相关性甲状腺疾病,影响327.8%的妊娠妇女。临床研究显示妊娠妇女临床甲减与自然流产发生风险增加相关,尽管妊娠亚临床甲减导致妊娠并发症发生率低于临床甲减,但仍可导致自发流产的危险性增加。自然流产是妊娠常见的并发症之一,发生率1015%。妊娠妇女亚临床甲减随着患病率的增加,在导致流产中的作用受到日益关注。但是,妊娠早期母体亚临床甲减如何导致流产发生的机制目前尚不清楚。母体成功孕育健康的胎儿是一个复杂而精细的过程。“植入窗口期”被认为是决定是否继续妊娠的最关键时期。植入成功,胚囊继续发育为胎儿,否则将导致流产。子宫在植入窗口期卵巢分泌的雌激素（E2）和孕酮（P4）的作用下,内膜组织发生着转化,以保证内膜组织在此时间段内具有容受性的状态。E2和P4对子宫的作用是通过局部分泌的细胞因子和生长因子自分泌和旁分泌的作用的调节。白血病抑制因子（LIF）是IL-6家族中具有广泛生物学功能的细胞因子,是促排卵、胚囊植入、胚胎发育等阶段的关键因子。在许多哺乳类动物（包括人类）中,LIF都被证实是囊胚植入过程中重要的调节器,是子宫进入容受性状态的标志。LIF由子宫内膜的腺上皮细胞产生,被分泌至子宫腔内,之后与分布于腔上皮细胞膜表面的LIF受体复合物（由LIFR和gp130组成）结合形成稳定的LIF-LIFR-gp130复合物。该复合物可以通过激活JAK1酶的活性,从而对其胞内部分的结构域进行磷酸化的作用,进而完成对STAT3的磷酸化的作用。妊娠母体亚临床甲减是否影响胚囊的植入,以及是否通过调节LIF/STAT3通路从而影响流产及具体机制仍不清楚。本研究通过建立亚临床甲减孕鼠的动物模型,研究其对妊娠结局的影响,并在子宫LIF/STAT3信号通路蛋白分子水平上探讨孕早期母体亚临床甲减对流产影响的机制。研究方法:150只健康雌性Wistar大鼠,被随机平均分成3组（每组50只）。（1）正常对照组（CON）:给予进行假甲状腺切除术,术后30天起每日给予行颈背部皮下注射生理盐水;（2）临床甲减组（OH）:给予行甲状腺全切术,待手术30天后开始每日颈背部皮下注射等量生理盐水;（3）亚临床甲减组（SCH）:在临床甲减大鼠成功建模的基础上,给予持续每日颈背部皮下注射左甲状腺素（L-T4）,浓度0.9μg/（100g·d）。各组成功建模后,将雌鼠与雄鼠按2:1的比例进行合笼,次日对雌鼠进行阴道涂片,将镜下观察到精子的雌鼠确定为妊娠第0天,标记为E0。分别于E0、E5、E13天留取组织。分别测量E0和E5天子宫的重量、植入位点数,E13天胎盘和胚胎的重量,统计胚胎的吸收率。用免疫组化的方法检测E0、E5天的子宫组织TSHR、TR-α、TR-β、ER-α、p-STAT3及STAT3的蛋白表达情况。用RT-PCR的方法检测E0、E5天的TSHR、TR-α1、TR-α2、TR-β、LIFR、gp130及JAK1的mRNA的表达情况。用western blot的方法检测ER-α、LIF、gp130、JAK1及p-STAT3的蛋白表达水平。采用统计学软件SPSS 16.0进行分析各组模型中各指标的差异。结果:1、术后4周SCH组与OH组的TSH水平显著高于CON组,而TT4则显著低于CON组,表明甲状腺全切术成功。在药物连续注射9天后通过眶后静脉采血验证SCH组的大鼠TT4恢复正常水平,TSH水平依然高于CON组,亚临床甲减鼠建模成功;而OH组TSH显著升高,TT4显著低于CON组,符合甲减改变。2、E0、E5天SCH组和OH组孕鼠子宫的重量明显低于CON组（P<0.05）。3、3、E13天SCH组和OH组胎盘和胚胎的重量明显低于CON组（P<0.05）。4、统计E5天SCH组和OH组的植入位点数明显低于CON组（P<0.05）,SCH组和OH组的胚胎吸收率明显高于CON组（P<0.05）。5、免疫组化检测TSHR、TR-α和TR-β的蛋白表达水平,结果显示,E0、E5天SCH组和OH组的TSHR的面积积分光密度值（AIOD）明显高于CON组（P<0.05）,TR-α和TR-β的AIOD三组间无明显差异。6、RT-PCR检测TSHR、TR-α和TR-β的mRNA表达水平,结果显示,E0、E5天SCH组和OH组的TSHR的mRNA表达水平明显高于CON组（P<0.05）,TR-α和TR-β的mRNA表达水平三组间无明显差异。7、western blot检测ER-α、LIFR、gp130、JAK1和p-STAT3的蛋白表达水平,结果显示,E0天SCH组和OH组各指标的蛋白表达水平明显高于CON组（P<0.05）。E5天各指标的表达水平无明显差异。从E0天到E5天,CON组各指标有显著的升高趋势（P<0.05）,而SCH组和OH组无明显变化趋势。8、RT-PCR检测LIFR、gp130和JAK1的mRNA表达水平,结果显示,E0天SCH组和OH组各指标的mRNA表达水平明显高于CON组（P<0.05）。E5天各指标的mRNA表达水平无明显差异。从E0天到E5天,CON组各指标有显著的升高趋势（P<0.05）,而SCH组和OH组无明显变化趋势。9、免疫组化检测ER-α、p-STAT3和STAT3蛋白表达水平,结果显示,E0天SCH组和OH组各指标的AIOD值明显高于CON组（P<0.05）。E5天ER-α和p-STAT3的表达水平无明显差异。从E0天到E5天,CON组ER-α和p-STAT3的AIOD值有显著的升高趋势（P<0.05）,而SCH组和OH组无明显变化趋势。E0、E5天STAT3的表达情况在各组间均无明显差异。10、给予Ishikawa细胞不同浓度的TSH（0、1 mIU/ml、10 mIU/ml、100mIU/ml）24h刺激后,ER-αmRNA及蛋白的表达水平均无明显变化;LIFR、gp130和p-STAT3的蛋白表达水平有明显的升高趋势（P<0.05）,STAT3的蛋白表达水平无明显变化。11、TSH 10mIU/ml作用于Ishikawa细胞不同时间（0、6h、24h、48h）后,ER-αmRNA和蛋白的表达水平均无明显变化;LIFR、gp130和p-STAT3的蛋白表达水平有明显的升高趋势（P<0.05）,STAT3的蛋白表达水平无明显变化。结论:1、大鼠甲状腺切除,外源L-T4注射可以建立稳定的可重复的亚临床甲减动物模型。2、母鼠孕早期甲状腺功能异常对妊娠结局会产生不良的影响,其中临床甲减较亚临床甲减产生的不良影响更加明显。3、甲减及亚临床甲减孕鼠子宫组织中存在TSH受体（TSHR）的上调,甲状腺激素受体（TR-α和TR-β）未见明显变化。4、TSH水平的升高有可能通过上调ER-α的表达使母鼠子宫对雌激素的反应发生了异常,使得子宫内膜LIF/STAT3信号通路在不适当的时机内升高,使子宫内膜和囊胚的发育出现了“非同步性”,最终导致胚胎植入失败,参与了甲减及亚临床甲减所引起的不良妊娠结局。