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目的
探讨抗癌活性肽(anti-GRncer bioactive peptide,ACBP)对人胃癌细胞BGC- 823细胞周期的影响及其作用机制。
方法
体外培养BGC-823细胞,将不同浓度的 ACBP作用于细胞,MTT法测定不同浓度ACBP对BGC-823细胞的生长抑制率;电镜、HE染色观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化;免疫细胞化学及RT-PCR技术分别检测细胞周期调控因子p21、p27、基因及蛋白表达的变化。
结果
不同浓度(10~25.0ug/nd)的ACBP均能抑制BGC-823细胞的生长,且具有浓度和时间依赖性,25.0ug/ml ACBP作用72h抑制率分别为84.4%,中效浓度(IC<,50>)分别为17.86ug/ml。形态学观察显示ACBP作用48h、72h后,BGC-823细胞均典型的凋亡和坏死形态学改变。流式细胞仪检测发现ACBP作用48h、72h后,呈现G<,1>期阻滞。RT-PCR结果显示ACBP处理后,BCa2-823细胞的p21、p27 mRNA表达明显增加。免疫细胞化学分析发现ACBP能显著上调BGC-823细胞的p21、p27蛋白的表达。
结论
ACBP对BGC-823细胞的生长有明显的抑制作用,细胞周期发生G<,1>期阻滞,其抑癌机制可能与其调控细胞周期,激活细胞凋亡信号转导途径有关,使p21、p27重获表达,从而发挥其抗增殖作用。