嗜盐四联球菌clpB,dnaK,hrcA基因在耐盐机制中的相互作用

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嗜盐四联球菌CICC10469是本实验室从传统的酱酪中分离出的一株耐高盐的乳酸菌,具有耐受0M~3.5M盐浓度范围的特性。中度嗜盐菌的耐盐分子机制中分子伴侣dnaK与clpB相互协作组成多分子功能系统调节耐盐过程,而hrcA基因负调控dnaK基因的表达以应对外界盐胁迫刺激。为探究本株菌的耐盐机制,通过PCR技术克隆,测序得到clpB,dnaK,hrcA基因的序列,进一步通过RT-PCR技术检测菌体不同生长时期不同盐浓度下,基因的表达量情况。结果表明:本实验所用嗜盐四联球菌菌株也含有嗜盐相关的基因clpB,dnaK,hrcA等,且基因clpB,dnaK,hrcA与国外嗜盐四联球菌的clpB,dnaK,hrcA基因高度同源。不同生长周期不同盐浓度下基因clpB,dnaK,hrcA的表达情况表明基因clpB,dnaK,hrcA的表达与菌体生长周期密切相关。基因clpB与dnaK相互协作维持细菌在高盐浓度下正常生长,在菌体生长早期,clpB起主要作用,随着菌体的生长,clpB的调节作用在逐渐地减弱,danK的表达量却在逐渐增加。dnaK在逐渐起到主要的调节作用。两基因共同调节菌体生长,应对外界高盐胁迫。hrcA与dnaK基因属于同一操纵子,hrcA基因与dnaK基因在菌体生长的各时期随着盐浓度的变化均呈现相同的表达趋势。
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