【摘 要】
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金属硫蛋白（MTs）是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白,广泛存在于细菌、真菌、植物、无脊椎动物和脊椎动物中,因其功能独特,近年来对MT各方面的研究也日益受到重视。它能够清除体内自由基防治衰老,增强机体对不良环境的适应,参与体内微量元素代谢,解除重金属毒性等作用。MT多基因家族至少含有4个亚型,即MT-Ⅰ、MT-Ⅱ、MT-Ⅲ和MT-Ⅳ。本研究在前人对MT-I/II/III研究的基础上,设计特
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金属硫蛋白（MTs）是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白,广泛存在于细菌、真菌、植物、无脊椎动物和脊椎动物中,因其功能独特,近年来对MT各方面的研究也日益受到重视。它能够清除体内自由基防治衰老,增强机体对不良环境的适应,参与体内微量元素代谢,解除重金属毒性等作用。MT多基因家族至少含有4个亚型,即MT-Ⅰ、MT-Ⅱ、MT-Ⅲ和MT-Ⅳ。本研究在前人对MT-I/II/III研究的基础上,设计特异性引物MT-IVSP1、MT-IVSP2和MT-IVSP3、MT-IVSP4,通过RT-PCR方法从动物组织RNA中扩增出了基因编码区全序列,通过T4DNA连接酶将目的基因连入载体pGEM?-T Vector的SacⅡ和SpeⅠ位点,构建质粒DNA文库。再经过DNA文库的筛选、感受态DH5α的转染、质粒DNA的提取、限制性酶切以及测序分析后,获得GenBank各物种登录号,牦牛（yak）MT-IV（Accession No.: EF141034）,山羊（goat）MT-IV（Accession No.: EF470251）和绵羊MT-IV（sheep）（Accession No.: EF624067）,长度均为189bp,从起始密码子ATG开始到终止密码子TGA结束,所以三段序列均为MT-IV序列的编码区全长。将各序列在NCBI上进行同源性搜索发现,MT-IV核苷酸序列在不同动物中都存在C-X-C、C-X-X-C、C-C-X-C-C保守的三肽结构,说明其在进化上十分保守。本实验第二阶段为对前人所提出的MT-IV基因只存在于复层扁平上皮中的说法进行了实验论证,经过大量的实验证明MT-IV基本没有组织特异性,只存在表达量多少的问题。
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本试验以南方根结线虫（Meloidogyne incognite）二龄幼虫为靶标,以前期筛选出的娄彻氏链霉菌（Streptomyces rochei）ZZ-9菌株（菌株保存号:CGMCC No.15245）为试验材料,测定其活菌液、发酵滤液对南方根结线虫二龄幼虫的毒杀作用。并与阿维菌素和噻唑膦混配,以期达到协同增效和降低化学农药使用的目的,为田间防效提供一定理论依据。对ZZ-9菌株发酵液中杀线虫活
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本研究根据东祁连山高寒草地不同植被类型,选取具有代表性的三个灌丛样地和三个草地样地,即杜鹃灌丛（Rhododendron fruticosa shrub land）、高山柳灌丛（Salix cupularis fruticosa shrub land）、金露梅灌丛（Dasiphoru fruticosa shrub land）、珠芽蓼草地（Polygonum viviparum grassland