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菌种是食用菌产业的重要生产资料之一,其质量优劣直接关系到食用菌产业能否良性发展。本研究F0025、F0030、F0305三个金针菇菌株为材料,从纯度、品种、活力三个方面进行研究,分别建立了一套比较完整的金针菇菌种质量检测技术。主要结果如下:1.纯度检测以三个菌种的菌丝为材料,分别从细菌、霉菌孢子、内生细菌、病毒四个方面检测。细菌检测采用平板划线法、平板涂布法、液体培养和煮沸法快速提取DNA PCR扩增,通过人为控制,每种方法都能检测到一个最低限度。霉菌孢子检测采用平板涂布法,最低能检测到每克菌种中有100个孢子。内生细菌的检测,以原生质体爆破法和抗生素处理法进行检验,最终都未检测到内生细菌。病毒的检测采用dsRNA技术和酶切验证,结果显示阳性对照中检测到了dsRNA,而其他三种金针菇中均未检测到,说明此方法能够用于食用菌病毒的检测,以及实验采用的三种金针菇都未感染病毒。2.品种鉴别本文从种间和种内两个层次对金针菇品种进行鉴别。通过ITS- RFLP技术能将金针菇与其他种食用菌鉴别开来。再用DNA分子标记技术进行金针菇种内的鉴别。考虑到SRAP与其他的分子标记相比具有简便、稳定、多态性高等特点,本实验以三种金针菇SRAP扩增,结果筛选了22对SRAP引物,获得了33个多态性片段,鉴别准确率在99.99%以上。3.菌种活力通过制备不同菌龄的金针菇菌种,测定了几个与菌种老化相关的生理生化指标,结果表明:CMC酶、木聚糖酶、淀粉酶和TTC酶与菌龄无显著相关;而多酚氧化酶活力与菌龄有显著相关,随着菌龄的增大多酚氧化酶活力逐渐降低,因此多酚氧化酶能作为检测菌种活力的指标。耐高温能力检测中,随着菌龄的增大耐高温能力减小或消失,因此,耐高温能力也可以作为检测菌种活力的一个指标。