【摘 要】
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目的:
观察肾病Ⅰ号方(SBYHF)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的增殖、细胞外基质含量及细胞因子的影响,探讨其抗肾纤维化的可能作用机制,为拓展其临床应用提供实验依据
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目的:
观察肾病Ⅰ号方(SBYHF)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的增殖、细胞外基质含量及细胞因子的影响,探讨其抗肾纤维化的可能作用机制,为拓展其临床应用提供实验依据。
方法:
运用体外培养大鼠肾小球系膜细胞技术及体外药物血清实验方法,将系膜细胞分为5组:正常对照组、肾病Ⅰ号方低剂量组、肾病Ⅰ号方中剂量组、肾病Ⅰ号方高剂量组、洛汀新组,分别培养24h和(或)48h,在倒置显微镜下观察细胞生长形态的变化,采用CCK-8法测定细胞增殖情况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)的分泌,应用实时荧光定量PCR(RealTime-PCR)技术检测细胞IL-6、CTGFmRNA的表达。
结果:
肾病Ⅰ号方各剂量组培养24小时或48小时后,系膜细胞生长稀疏,贴壁性减弱,细胞突触减少,胞浆内颗粒物减少,细胞立体感及折光度减弱。肾病Ⅰ号方各剂量组能的OD值均显著降低,与正常对照组比较,具有显著统计学差异(p<0.01或p<0.05),且其抑制系膜细胞增殖的作具有一定的剂量及时间依赖性。肾病Ⅰ号方各剂量组能明显减少系膜细胞FN和COI-Ⅳ的分泌,并呈现一定的剂量及时间依赖性,与正常对照组比较,差异具有统计学意义(p<0.01或p<0.05)。实验各组培养24h后,肾病Ⅰ号方各剂量组的IL-6和CTGF的mRNA的表达均明显降低,与正常对照组比较,具有显著统计学差异(p<0.01)。而且肾病Ⅰ号方各剂量组之间对系膜细胞IL-6和CTGF的mRNA的表达的抑制作用具有一定的剂量依赖性的特点(p<0.01或p<0.05)。
结论:
肾病Ⅰ号方能通过抑制肾小球系膜细胞的增殖,减少细胞外基质的积聚及下调IL-6、CTGF的基因表达而起到抗肾纤维化的作用,延缓肾脏疾病进展。
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