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目的
对大鼠背根神经节(Dotal ganglion root,DRG)神经元所记录的天然H<+>-门控电流进行分类,并研究大鼠DRG神经元各型不同的天然H<+>-门控电流与其组成的酸敏感离子通道(Acid-sensing ion channel,ASIC)亚基问的相关性。
方法
采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的大鼠。DRG神经元H<+>-门控电流,结合单细胞免疫组织化学方法检测其组成的ASIc亚基。
结果
1.依据H<+>-门控电流的激活及失活动力学,电流形状特点,细胞直径大小,pH依赖性等以及其它参数可将其分为:1)T-型;2)S-型;3)B-型和4)O-型。
2.测定了四种类型H<+>-门控电流的激活动力学(10%-90%上升时间)与细胞直径大小的相关性,其中三种类型的激活动力学与细胞直径有关:T-型、B-型和O-型(r=0.69,P<0.01);而S.型电流与细胞直径无关(r=0.12,P>0.05)。
3.对S-型电流的量-效关系进行了分析,其阈值在pH6.0左右;最大浓度>pH2.0。在pH4.5~pH2.5之间出现一外向电流,量.效曲线呈钟形。
4.证明了S-型与O-型电流外向电流成分的k<+>流性质。
5.提供了H<+>-门控电流的表型与其基因型的联系,阳性染色结果:1)T-型为ASICl,ASIC2a,ASIC3;2)S-型为ASIC2a,ASIC4;3)B-型为ASICl,ASIC3;和4)O-型为ASICl,ASIC3,ASIC4。
结论
1.大鼠DRG神经元天然H<+>-门控电流可分四型:T-型、S-型、B-型和O-型。
2.T-型、B-型和O-型H<+>-门控电流与细胞直径相关。
3.S-型和O-型H<+>-门控电流的外向电流成分为钾电流。