目的:建立沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体、鹦鹉热嗜衣原体的环介导等温扩增技术检测方法,探讨适合基层和现场检测的快速灵敏实用的分子生物学检测方法。方法:用细胞培养并采用吉姆萨染色或间接免疫荧光染色进行鉴定3种衣原体,以它们的特异基因为靶序列,利用Primer Explorer V4分别设计4~6条LAMP特异引物,利用细菌基因组DNA提取试剂盒提取病原体DNA模板,建立LAMP反应体系,并优化反应体系。60℃-65℃孵育60min,完成对靶病原体基因的扩增,扩增结果通过肉眼、SYBR Green I染色及电泳来判定。同时设立对照组以评价LAMP法的特异性,以及10倍系列稀释模板检测其敏感性。结果:3种衣原体经吉姆萨染色或间接免疫荧光染色后均能观察到特异的衣原体包涵体。提取出的3种衣原体DNA模板经优化的LAMP扩增后,肉眼、SYBR Green I染色和电泳均能观察到LAMP扩增产物的出现,电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组均无扩增产物,结果显示3种衣原体LAMP检测方法具有较高的特异性;LAMP可检测到沙眼衣原体、肺炎嗜衣原体及鹦鹉热嗜衣原体的最低浓度分别是1 pg/μL、100 pg/μL、0.1pg/μL,高于或与普通PCR敏感性相当。结论:建立了3种衣原体特异、敏感、简单和快速的LAMP检测方法。