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目的:探究ADAR1对HBV复制的影响。方法:1.运用Western blot和RT-qPCR技术检测肝癌Huh7细胞系受IFN-α,β,γ作用前后,ADAR1在蛋白质和转录水平的表达差异。2.用siRNA沉默肝癌Huh7细胞系以及HBV稳定复制HepG2.2.15细胞系中ADAR1表达。之后应用Southern blot与实时荧光定量PCR、Western blot、ELISA、RT-qPCR分别检测HBV DNA、HBc、HBs、HBe以及HBV RNA等HBV复制参数水平。3.在肝癌细胞系Huh7、HepG2中共转染ADAR1表达质粒与HBV基因型D复制质粒,在HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15、HepAD38中转染ADAR1表达质粒。同样应用Southern blot与实时荧光定量PCR、Western blot、ELISA、RT-qPCR分别检测HBV DNA、HBc、HBs、HBe以及HBV RNA等HBV复制参数水平。4.在肝癌Huh7细胞系中共转染ADAR1表达质粒与HBV基因型A、B、C复制质粒。应用Southern blot检测HBV DNA水平。5.构建ADAR1表达质粒脱氨基酶结构域点突变体(P110 H910A、P110 E912A、P110 C966A、P110 C1036A、P150 H910A)。在肝癌Huh7细胞系中共转染该突变体与HBV基因型D复制质粒。应用Southern blot检测HBV DNA水平。结果:1.在肝癌Huh7细胞系中,ADAR1 P150在蛋白和转录水平受Ⅰ型IFN-α(蛋白水平:F=326.346,P<0.05;转录水平:F=8.942,P<0.05),IFN-β(蛋白水平:F=263.173,P<0.05;转录水平:F=91.767,P<0.05)诱导表达。2.在肝癌Huh7细胞系(F=879.386,P<0.05)以及HBV稳定复制HepG2.2.15细胞系(P<0.05)中,内源性ADAR1在DNA水平促进HBV复制。3.在肝癌细胞系Huh7(P<0.05)、Hep G2(P<0.05);HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15(P<0.05)、HepAD38(P<0.05)中,过表达ADAR1在DNA水平促进HBV复制。。4.ADAR1在DNA水平促进HBV A(F=30409.807,P<0.05)、B(F=139576.050,P<0.05)、C(F=33952.793,P<0.05)基因型的复制。5.ADAR1脱氨基酶突变体失去了对HBV DNA的促进作用(P110突变体:F=50546.022,P<0.05,各组间差异均具有统计学意义;P150突变体:F=3168.668,P<0.05,各组间差异均具有统计学意义)。结论:ADAR1在DNA水平促进HBV复制,且该作用依赖于ADAR1的脱氨基酶活性。