头孢霉促进绿藻DX01生长及脂类合成的研究

来源 :河北工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvyuxuan36520091
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藻类是生产生物柴油的主要原料,而一些真菌和细菌能够与藻类共生并提高其产量,因此藻-菌共生培养技术成为国内外研究的热点。本文通过将蓝藻共生真菌Simplicillium lanosoniveum与绿藻DX01混合共生培养,来研究共生真菌对绿藻细胞生长和脂类合成的影响。实验采用稀释涂布法、离心洗涤法与抗生素处理法相结合的方法,得到了绿藻DX01的无菌种。实验表明,硫酸庆大霉素和硫酸卡那霉素比例为1:1,质量分数为0.2%的次氯酸钠溶液处理10 min对绿藻中的杂菌有很好的抑制效果。多次传代消除抗生素的影响,稀释涂布未发现其它杂菌,说明由单藻落制备的藻种为无菌种。通过对绿藻DX01中杂菌的初步鉴定,主要包括四种细菌,菌落形态分别为N1粉色圆形、N2黄色圆形、N3黄色不规则褶皱、N4白色圆形。通过菌落计数可知,藻液中N1菌体密度最高,为2.25×107个/mL,N3菌体密度最低,为0.1×107个/mL。与绿藻DX01单独培养相比,混合培养绿藻的比生长速率(0.20 d-1),细胞产率(0.17 g/(L·d))和生物量(2.85 g/L)分别提高了10.3%,51.3%和55.7%;脂类比合成速率(0.68 mg/(g·d)),合成速率(1.95 mg/(L·d))和含量(220.4 mg/g)分别提高了33.3%,107.5%和32.0%,并且脂类中的饱和脂肪酸以及单不饱和脂肪酸C18-1和C18-2的比例上升,有利于生物柴油的加工。真菌Simplicillium lanosoniveum能够促进绿藻的生长和脂类合成,因此藻-菌混合培养可用于生物柴油原料的生产。最后,本文研究了绿藻DX01类胡萝卜素与脂类的关系。用BBM培养基作为绿藻的营养物质,置于光照条件下静置培养,通过丙酮作为提取剂来获取藻体细胞内的类胡萝卜素,进行液相色谱分析。可知绿藻细胞内所含类胡萝卜素的主要类型有:β-胡萝卜素、叶黄素、玉米黄质等。由气相色谱分析可知,绿藻DX01中的主要脂肪酸有C16-0、C18-2、C18-3,分别占总脂肪酸含量的15.87%,20.46%和19.33%。绿藻DX01总脂含量在成熟期时积累最多,为169.3 mg/g,在绿藻门植物中属于含量比较高的藻类。类胡萝卜素含量在第16天时达到最大值为16.984 mg/g。类胡萝卜素含量的变化趋势基本与总脂含量相同,随着总脂的不断积累,类胡萝卜素含量也不断增加。
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