猪SOCS-3基因cDNA的克隆及其在脂肪和肌肉组织表达的初步研究

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脂肪组织具有内分泌功能,能够产生和分泌多种脂肪源性因子,影响脂肪组织本身乃至整个机体的能量代谢平衡。细胞因子作用的显著特点是其作用的时间性及空间性均受到严格的调控,主要有3种蛋白质家族参与其信号转导的负调节,分别是SOCS、PIAS和SHP-1,其中以SOCS的研究最为深入。SOCS-3是该家族的主要成员,它参与了脂肪及肌肉组织中多种细胞因子的信号转导,因而是研究脂肪及肌肉组织发育和代谢的重要候选因子。本实验以猪为研究对象,从SOCS-3基因的克隆入手,初步探讨SOCS-3在猪脂肪及肌肉组织中的表达规律及其可能的调控机理,主要研究结果如下:1.克隆猪SOCS-3cDNA基因,Genbank的登陆号为DQ644577。同源性比对结果发现:猪SOCS-3基因与人、大鼠和小鼠的同源性分别为92%、88%和88%。进一步的结构域分析发现,推测的猪SOCS-3蛋白序列含有SOCS家族基本的SH2结构域和SOCS-box。2.对该基因进行组织分布研究发现:心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、皮下脂肪和内脏脂肪中均有较高丰度的SOCS-3 mRNA表达,其中肺脏和脾脏的表达丰度最高,肝脏和内脏脂肪组织中的表达量最低。而皮下脂肪组织中SOCS-3 mRNA表达丰度显著高于内脏脂肪的。这些结果提示,SOCS-3可能参与了猪皮下脂肪和内脏脂肪积脂能力差异的调控。此外,SOCS-3在肌肉组织中的作用也是一个值得深入研究的问题。3.与大白猪相比,八眉猪皮下脂肪组织和肌肉组织SOCS-3mRNA表达丰度随年龄的增长而升高,证实了猪皮下脂肪和肌肉组织Leptin抵抗是年龄和体脂含量共同作用的结果,单一因素均不能诱导其产生;此外,八眉猪内脏脂肪组织SOCS-3mRNA表达丰度不随年龄的增长而变化,推测八眉猪脂肪组织可能存在选择性Leptin抵抗机制。4.不同品种猪皮下脂肪组织SOCS-3mRNA表达丰度差异显著,脂肪型的高于瘦肉型的,ob基因mRNA的表达具有相似的规律。同时发现SOCS-3 mRNA表达与控制体脂沉积的主要基因ob基因mRNA表达呈正相关。推测SOCS-3通过负调控Leptin信号通路进而影响猪体脂沉积。提示SOCS-3表达差异可能是导致两种经济类型猪脂肪沉积能力不同的主要原因之一。5.不同品种猪肌肉组织SOCS-3基因mRNA表达丰度差异显著,与脂肪组织不同的是,瘦肉型的高于脂肪型的,同时发现SOCS-3 mRNA表达与控制骨骼肌发育的主要基因IGF-ⅠmRNA表达呈正相关。初步推测升高的SOCS-3通过正调控IGF-Ⅰ信号通路进而促进肌肉发育。提示SOCS-3可能是导致两种经济类型猪肌肉发育能力差异的主要原
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