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目的建立SYBR Green I实时定量逆转录PCR(SYBR Green I real-time quantitative RT-PCR,SYBR Green I Q-RT-PCR)体系检测乳腺癌患者外周血及乳腺癌、癌旁乳腺组织人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMAM)mRNA表达的量,探讨hMAM mRNA作为检测CTCs(circulating tumor cells)标记物的可行性,分析外周血存在CTCs及其量与乳腺癌临床、病理特点之间的联系。方法用SYBR Green I Q-RT-PCR检测hMAM mRNA在乳腺癌细胞株MDA-MB-231和61例乳腺癌患者、33例乳腺良性肿瘤患者、11例健康志愿者的外周血;10例乳腺癌组织、10例对应癌旁乳腺组织中表达的量。结果1.SYBR Green I Q-RT-PCR连续检出乳腺癌细胞株MDA-MB-231极低表达hMAM mRNA,CT值在34.45~34.67,变异系数(CV)=0.25%;乳腺良性肿瘤患者及健康志愿者外周血hMAM mRNA均阴性,显示了该方法良好的重复性、灵敏度及特异性。2.乳腺癌患者外周血hMAM mRNA表达阳性率为16.4%(10/61)。其中0期0/3,Ⅰ期0/5,Ⅱ期5/33(15.15%),Ⅲ期5/20(25.0%);No 3/31(9.7%),N1 2/12(6.7%),N2 4/15(26.7%),N3 1/3(33.3%);hMAM mRNA阳性率随其分期进展而增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。10例外周血hMAM mRNA阳性患者中,其乳腺癌组织HER2阳性表达者8例,HER2阴性0例,差异有显著性(P=0.028)。外周血hMAM mRNA表达的量在198～6210,(X|-)±S=1119.9±1829.4,与临床、病理特征间比较无统计学差异。3.乳腺癌组织hMAM mRNA阳性率为80%(8/10)。其中Ⅰ期1/1(100%),其相对量为37800;Ⅱ期6/6(100%),中位相对量为100.4;Ⅲ期1/3(33.3%),相对量2.94。其中2例乳腺癌患者不论其癌组织或癌旁乳腺组织hMAM mRNA均阴性;癌组织hMAM mRNA阳性的乳腺癌患者其癌旁乳腺组织亦阳性。乳腺癌组织hMAM mRNA表达的量与其临床、病理特征间比较无统计学意义。结论1.本研究建立SYBR Green I Q-RT-PCR体系可对乳腺癌患者外周血CTCs水平进行定量检测;也可对乳腺癌组织进行hMAM mRNA表达量分析。2.乳腺癌患者外周血有一定比例hMAM mRNA阳性表达,且与其乳腺癌组织HER2表达相关;乳腺癌及癌旁乳腺组织存在较高比例和较高水平hMAM mRNA表达,极少数乳腺癌及其癌旁乳腺组织同时不表达或低表达hMAM mRNA。3.hMAM mRNA可作为检测乳腺癌患者外周血CTCs的指标。4.乳腺癌患者外周血CTCs水平的预后意义需进一步对随访结果分析。