ATRA诱导的自噬对多发性骨髓瘤OPM2细胞的影响

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研究目的:近年来,由于自噬在肿瘤发生、发展、转移方面的特性,其逐渐成为肿瘤靶向治疗的研究热点。本研究观察了全反式维甲酸(ATRA)诱导多发性骨髓瘤细胞株OPM2自噬,并进一步研究了自噬对OPM2细胞增殖的影响。研究方法:1.培养多发性骨髓瘤细胞株OPM2细胞,采用MTT法检测ATRA不同浓度组(0、2、4、6、8、10μmol/L)、不同时间组(24h、36h、48h)对OPM2细胞增殖的影响,以确定ATRA作用于OPM2的最佳浓度和最佳时间;2.实验分为对照组和实验组,电镜下观察自噬小体的形成、Western blot分析自噬标记蛋白LC3-Ⅱ的表达以明确自噬的发生;3.MTT法检测抑制自噬前后OPM2细胞增殖的变化。研究结果:1.MTT结果显示ATRA能有效的抑制多发性骨髓瘤细胞株OPM2的增殖,并随着浓度和时间的增加,其抑制率也相应的增高,呈浓度和时间依赖性,不同药物浓度组、不同作用时间对多发性骨髓瘤OPM2细胞增殖抑制率差异均具有统计学意义(P<0.05)。且24h、36h、48h的IC50分别为9.3umol/L、4.8umol/L、3.6umol/。在随后的实验中采用浓度为5umol/L的ATRA处理OPM2细胞36h;2.ATRA作用于OPM2细胞后,电镜下观察到自噬小体增多,Western blot检测到ATRA处理后LC3-Ⅱ蛋白表达增强,加入自噬抑制剂3-MA后LC3-Ⅱ表达减低。提示ATRA诱导OPM2细胞发生了自噬;3.MTT检测抑制自噬后OPM2细胞的增殖情况,发现抑制自噬后,ATRA对OPM2细胞增殖抑制作用增强。结论:1.ATRA能抑制多发性骨髓瘤细胞株OPM2细胞增殖,其增殖抑制作用呈一定的浓度和时间依赖性;2.ATRA能诱导多发性骨髓瘤OPM2细胞发生自噬;3.ATRA诱导的自噬对多发性骨髓瘤OPM2细胞具有保护作用。
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