【摘 要】
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目的探讨siRNA干扰Survivin基因表达对人胃癌SGC-7901细胞周期、增殖、凋亡的影响及其作用机制的初步探讨。方法针对Survivin mRNA序列设计合成siRNA转染人胃癌SGC-7901细胞
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目的探讨siRNA干扰Survivin基因表达对人胃癌SGC-7901细胞周期、增殖、凋亡的影响及其作用机制的初步探讨。方法针对Survivin mRNA序列设计合成siRNA转染人胃癌SGC-7901细胞。MTT法检测SGC-7901细胞增殖;RT-PCR法检测Survivin、Caspase-3基因表达;Western blot检测Survivin、Caspase-3蛋白表达;细胞免疫组织化学检测Survivin蛋白表达;流式细胞术检测SGC-7901细胞周期和细胞凋亡情况。结果Survivin siRNA能够有效抑制人胃癌SGC-7901细胞中Survivin的表达,与空白对照组比较,Survivin siRNA组人胃癌SGC-7901细胞生长、增殖速度减缓(p<0.05);PI染色流式细胞术检测显示, Survivin siRNA组凋亡率为(30.0%±0.85),高于空白对照组(1.61%±0.46)、脂质体组(2.35%±0.51)及阴性对照组(3.80%±0.73)(p<0.05);Survivin siRNA组细胞聚集在G0/G1期,S期细胞减少(p<0.05);Survivin在mRNA和蛋白表达水平均显著下调(p<0.05),而Caspase-3在mRNA水平变化不明显(p>0.05),而在蛋白表达水平明显升高(p<0.05)。结论1. Survivin siRNA转染细胞后可明显抑制人胃癌SGC-7901细胞中Survivin基因的表达。2. Survivin siRNA抑制Survivin基因表达后,可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,促进细胞凋亡,对G0/G1期有阻滞作用。
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