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土传病害是指土壤中的真菌、细菌、线虫及病毒等植物病原体在条件适宜的情况下,以土壤作为媒介,从作物的根部或茎部侵害作物引起的一类植物病害,常对农业生产造成严重的影响。该类病害的防治主要采取化学防治法,但化学药剂的长久使用会污染土壤、水体和大气,破坏生态平衡,同时,农作物中残留的化学药剂成分对人类的健康也造成了严重的威胁。生物防治即利用拮抗微生物防治土传病害可以克服化学防治的上述弊端。而且,随着人们环保意识的增强,对食品安全问题的重视,以及对生态环境建设,保护生物多样性和农业可持续发展的要求,使得生物防控手段成为当前土传病害防治新方法研究和开发的热点。本研究以常见土传病害病原为靶标菌,旨在分离一批具有较强生防潜力的拮抗微生物,以拮抗能力最强的菌株为重点研究对象,对其进行鉴定、防病促生试验,以及优化其发酵培养基及培养条件,明确其生防机理。本论文的主要结果如下:1.以辣椒疫霉菌(P.capsici)为靶标菌,利用稀释平板涂布法及十字对峙法从辣椒根际土壤中筛选出23株有拮抗能力的细菌,其中拮抗菌PBS14作用最强,抑菌圈直径为26.0 mm,且对几种常见土传病害病原菌均具有极强的抑菌效果,具有产吲哚乙酸(IAA)、解磷、产氨能力,是一株具有很强生防潜力的拮抗菌;结合形态学特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列分析,确定其为解淀粉芽孢杆菌,英文名称为Bacillus amyloliquefaciens。2.以辣椒为供试植物进行盆栽试验,结果表明,解淀粉芽孢杆菌PBS14可有效地防治辣椒疫病的发生,对比对照组(CK 1),菌株PBS14的防治效果为77.27%;另外,菌株PBS14还有显著地促进辣椒植株的生长,辣椒各项生长指标都得到了较好地提高,对比对照组(CK a),株高提高17.4%,茎粗提高38.8%,地上部分干重提高38.8%,根系干重提高53.8%。3.以抑菌圈直径作为主要评价指标,采用单因素试验及均匀设计法优化解淀粉芽孢杆菌发酵培养基组份,确定其最佳培养基组份为蔗糖0.541%,酵母浸出粉2%,KH2PO4 0.125%,MgSO40.025%,抑菌圈直径达到21.92 mm,实测达到21.47 mm;采用单因素试验及响应面法优化其发酵培养条件,确定其最优培养条件为发酵温度28℃,250 mL锥形瓶装液60 mL,摇床转速210 r/min,发酵时间48 h,接种量4%,抑菌圈直径达到32.1292 mm,实测达到31.97 mm。4.采用酸沉淀及甲醇抽提法从解淀粉芽孢杆菌PBS14的无菌发酵液中提取得到脂肽粗提物,HPLC层析分离出5个组份,其中a号峰具有抑菌活性,利用HPLC-ESI-MS分析鉴定其主要成分,确定其主要抑菌物质为C15 bacillomycin D;挥发性物质平板及立体叶片抑菌试验结果表明,菌株PBS14挥发性气体对绝大多数植物病原菌都有极强的抑制作用,可有效地防治病原菌的对植物的侵害,采用顶空固相微萃取法收集挥发性物质,并进行GC-MS分析,表明菌株PBS14至少产生了 34种挥发性物质,主要是苯类、烷类、醇类、酮类、醛类和脂类等。选择了 16种挥发性物质纯品进行抑菌实验,结果表明其均具有较强的抑菌活性。5.诱导抗性试验结果表明,同时接种解淀粉芽孢杆菌PBS14和辣椒疫霉菌(P.capsici)对比对照、单独接种PBS14和辣椒疫霉菌(P.capsici),POD、PPO和PAL的酶活性能快速提升并且显著提高,POD和PAL的酶活性在处理的48 h内能够快速上升并达到最大值,其后又开始逐步降低,但仍保持在一个较高的程度。PPO的酶活性在处理的72 h内能够快速上升并达到最大值,其后又开始开始逐步降低,同样也仍保持在一个较高的程度;同时接种解淀粉芽孢杆菌PBS14和辣椒疫霉菌(P.capsici)对比对照和单独接种PBS14和辣椒疫霉菌(P.capsici),POD、PPO、PAL的基因相对表达量相比单独接种辣椒疫霉(P.capsici)的处理,能快速升高并且有显著的提升,且都呈现相似的变化趋势。