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目的:1.研究生物检材中氰化物代谢物硫氰酸根（SCN-）及2-氨基噻唑啉-4-羧酸（ATCA）的稳定性;2.调查健康人群中吸烟者（18-27岁）氰化物代谢物硫氰酸根（SCN-）及2-氨基噻唑啉-4-羧酸（ATCA）的参考值范围。方法:1.氰化物中毒动物模型取健康家兔16只,每组8只随机分为2组进行实验。第一组以2LD50氰化钾经口灌胃,待家兔呼吸、心跳和反射全部消失后立即对家兔进行解剖取血液并进行充分混合,此组为染毒动物组;第二组经口灌入等量的生理盐水,处死后取其血液并进行充分混合,此组为空白对照组。两组血平均分为四份,分别置于20℃、4℃、-20℃以及20℃+1%NaF条件下保存。于0d,3d,7d,15d,30d,50d,95d取样检测各组中氰化物代谢物SCN-及ATCA的浓度。2.健康人群中吸烟者的标本采集志愿者100名（男性94人,女性6人）,年龄18-27周岁。所有参与者均有不同程度的吸烟习惯（详细见后表）,无基础疾病,所有志愿者充分了解实验目的后填写志愿者信息表并签署知情同意书。本实验所涉及的样本采集均已通过伦理审查。志愿者早晨空腹状态下,从肘静脉采血25mL,分别保存于无添加剂的采血管以及添加肝素钠的采血管中,静置30min后将所有采血管置于离心机中以5000rpm离心5min,于不同的采血管中得到血清、血浆和全血。分别取上清保存于冻存管中,放入-80℃冰箱,待检。3.提取检测硫氰酸根（SCN-）的检测:对待检生物样本进行液液萃取,后通过离子色谱法检测SCN-,使用标准品添加实验的保留时间进行定性,标准曲线法（外标法）进行定量。2-氨基噻唑啉-4-羧酸（ATCA）的检测:待检生物样本添加内标物ATCA-13C,15N2经液液萃取,通过LC-MS/MS法检测ATCA,使用保留时间、定量离子与定性离子对比例进行定性,标准曲线（内标法）进行定量。4.数据处理SPSS 20.0进行单样本多次重复测量数据的方差分析;DAS3.2.8药代动力学软件;GraphPad Prism7软件。结果:1.稳定性:SCN-的稳定性研究结果显示,各个检测时间点以及所对应的不同保存条件的P<0.05,表明不同时间测量的SCN-浓度以及各个保存条件下的SCN-浓度的交互作用具有统计学意义,即SCN-浓度随时间变化而变化,且保存条件不同对SCN-有不同的影响。经统计学软件分析,不同保存条件下,P<0.001,即认为不同保存条件下SCN-的浓度不全相等,在前三个时间点（0d,3d,7d）,四种保存条件变化趋势相近,有小幅度的下降趋势;7d后,20℃保存条件下测量值先明显增高,后逐渐下降,总体SCN-浓度高于其他三组保存条件;另外,4℃、20℃+1%NaF保存条件下,SCN-浓度略增高,-20℃保存条件下,SCN-浓度出现下降趋势。总体趋势为20℃保存条件下SCN-浓度最高,20℃+1%NaF保存条件下次之,随后为4℃、-20℃保存条件下最低。ATCA的稳定性研究结果显示,不同保存条件下,P<0.001,即认为不同保存条件下ATCA的浓度不全相等。总体来看,20℃、4℃以及20℃+1%NaF保存条件下的ATCA浓度均出现上升趋势。相同时间点,20℃保存条件下ATCA浓度的变化情况与4℃保存条件下ATCA的浓度变化趋势相似,差别无统计学意义（P>0.05）。相同时间点,20℃保存条件下ATCA浓度高于20℃+1%NaF保存条件下ATCA浓度高于-20℃保存条件下ATCA浓度,差别具有统计学意义（P<0.05）。2.健康人群中吸烟者体内氰化物代谢物的参考值范围:经本实验室前期实验验证,性别之间均无统计学差异,可整体分析血清、血浆、全血间有无统计学差异。数据显示,100例吸烟志愿者血清中SCN-含量为738.47±654.77ng/mL,范围为20.09ng/mL-3685.99ng/mL。血浆中SCN-含量为715.68±542.99ng/mL,范围为86.59ng/mL-2054.91ng/mL。全血中SCN-含量为463.99±435.51ng/mL,范围为41.25ng/mL-1979.46ng/mL。统计结果显示血清中SCN-含量与血浆中SCN-含量无统计学差异,但两者含量均高于全血中SCN-含量。100例吸烟志愿者血清中ATCA含量为126.07±81.12ng/mL,范围为12.57.6ng/mL-396.10ng/mL。血浆中ATCA含量为150.55±89.07ng/mL,范围为41.18ng/mL-379.00ng/mL。全血中ATCA含量为57.33±42.61ng/mL,范围为11.11ng/mL-284.03ng/mL。统计结果显示血清中ATCA含量与血浆中ATCA含量无统计学差异,但两者含量均高于全血中ATCA含量。3.氰化物中毒死者血中ATCA的浓度变化保存的4例氰化物中毒死者血中氰化物代谢物ATCA的浓度也呈先上升后下降的趋势,在一定保存时间范围内升高,且升高幅度与保存温度有关,温度越高,升高越快,升幅越大。这可能为ITCA转化为ATCA所致,因转化完全而达到峰值后,会出现因分解而下降的趋势。而在-20℃保存条件下ATCA较为稳定。结论:1.染毒致死家兔检材保存研究显示,保存血液中氰化物代谢物SCN-和ATCA均呈先上升后下降的趋势,-20℃保存时最为稳定,这与氰化物中毒案件检血中代谢物ATCA浓度变化相一致,提示ATCA可作为氰化物生前入体的生物标志物。相关检材应保存至-20℃条件下,以避免死后分解造成氰化物代谢物检测假阴性的结果;2.太原市健康吸烟者（18-27岁）全血、血浆、血清中氰化物代谢物SCN-和ATCA的正常值上限分别为1170.86ng/mL、1596.07ng/mL、1800.88ng/mL和126.42ng/mL、294.91ng/mL、257.55ng/mL,SCN-含量显著高于健康非吸烟者,ATCA含量与健康非吸烟者无统计学差异;3.4例氰化物中毒案件中ATCA的检测结果高于太原市健康者ATCA的正常值上限,提示ATCA可作为氰化物中毒死亡判定的标志物。