十味补益类、清热类中药对肉鸡肠黏膜屏障功能的影响

来源 :石河子大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ren584521
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目的:研究单味中草药水提物对肉鸡肠道黏膜屏障功能的保护作用,为中药预防治疗禽类疾病提供基础的理论资料。方法:280只1日龄黄麻鸡,分成十四组,两个空白组,两个模型组,十个中药组,每组20只,空白组于15-17日龄腹腔注射生理盐水,模型组和中药组于15-17日龄腹腔注射大肠杆菌。中药组在第18日龄开始饮用中药水提物,连续7天,每只鸡每天10ml浓度为0.02g/mL的中药液(生药1g/ml)。在给药后第7天和14天采血,采集小肠,计算肠道长度系数,制作组织切片观察肠黏膜形态结构;采用ELSA法检测血清二胺氧化酶,D-乳酸和内毒素含量;通过实时荧光定量PCR检测紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1和Occludin的mRNA表达量来探讨中药水提物对小肠机械屏障的保护作用;通过16S rDNA高通量检测技术对盲肠内容物的DNA进行测序,研究单味中药水提物对肠道生物屏障的盲肠菌群结构和数量的影响;通过计算免疫器官指数,ELSA法检测血清IgA、IgM、总蛋白、白蛋白和肠黏膜sIgA含量,石蜡切片-HE染色法检测肠黏膜免疫细胞数来探究中药水提物对小肠黏膜免疫功能的影响。结果:(1)给药后第7天,金银花,山药显著增加了肉仔鸡空肠长度(P<0.05),黄芪和白术显著增加了肉仔鸡回肠长度(P<0.05);山药,白术和白头翁分别显著增加了给药后第14天十二指,空肠和回肠长度(P<0.05);五味清热类和五味补益类中药十二指肠和空肠绒毛高度均显著升高(P<0.05)。(2)五个清热类中药组和五个补益类中药组的血清DAO、D-LA、ET含量与模型组相比均显著下降(P<0.05);五味清热类中药水提物均显著上调肠黏膜ZO-1和Occludin的mRNA相对表达量(P<0.05);五味补益类中药水提物对小肠黏膜ZO-1,Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量均有显著促进作用(P<0.05),以达到保护肠黏膜完整性的目的。(3)给药后第7天,五味清热类中药组ACE指数显著高于模型组(P<0.05),五味补益类中药组ACE和Chao指数均显著高于模型组(P<0.05),给药后第14天,五味清热类中药组Shannon指数均显著高于模型组(P<0.05);五味补益类中药组ACE指数和Chao指数均显著高于模型组(P<0.05);在给药后第7天,日龄对盲肠菌群的影响不大,主要是各中药组在影响盲肠菌群的多样性,在给药后第14天,日龄和中药对盲肠菌群同时起调控作用。(4)给药后第7天,紫花地丁组的胸腺指数、金银花和蒲公英组的法氏囊指数均显著升高(P<0.05);给药后第14天,金银花、连翘、蒲公英和白头翁组胸腺指数,蒲公英和白头翁组法氏囊指数显著高于模型组(P<0.05)。补益类中药黄芪组胸腺指数,党参组法氏囊指数在给药后第7天显著高于模型组(P<0.05);黄芪和山药组脾脏指数,黄芪和白术组法氏囊指数在给药后第14天显著高于模型组(P<0.05)。五味清热类中药均有助于小肠杯状细胞增殖(P<0.05),五味补益类中药均提高了淋巴细胞数和杯状细胞数(P<0.05),五个清热类中药和五个补益类中药小肠黏膜sIgA均显著升高(P<0.05)。结论:(1)五味清热类和五味补益类中药水提物均有促进十二指肠和空肠绒毛高度的生长,降低血清D-乳酸、二胺氧化酶和内毒素含量,促进肠黏膜形态结构完整,保护肠黏膜通透性,以达到保护肠黏膜屏障功能的作用;(2)五味清热类中药水提物均有助于肠黏膜ZO-1和Occludin的mRNA相对表达量的作用,五味补益类中药水提物对小肠黏膜ZO-1,Claudin-1和Occludin的mRNA相对表达量均有促进作用,以达到保护肠黏膜完整性的目的。(3)五味清热类中药组均有促进肉仔鸡盲肠菌群的物种丰度及多样性的作用,五味补益类中药组均促进盲肠菌群物种丰度,以达到调节盲肠菌群结构和数量的作用。(4)免疫球蛋白A和分泌型免疫球蛋白A的水平上十味中药均有显著地促进作用。五味清热类中药有助于小肠杯状细胞发育,五味补益类中药均提高了淋巴细胞数和杯状细胞数,说明单味中药水提物具有保护肠黏膜免疫功能的作用。
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