【摘 要】
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目的:支气管肺发育不良（BPD）作为早产的严重并发症,其病因复杂且预后不良。本研究试图通过研究DNA损伤修复蛋白NBS1在新生大鼠BPD模型中的动态表达规律,探索其对BPD发生、发展的影响,为阐明BPD氧化应激损伤的病理机制提供理论基础。研究方法:将100只新生SD大鼠在娩出的12小时内随机分配成BPD组（n=50）和对照组（n=50）。BPD组吸入氧浓度（Fi O2）为80%～85%（n=50）
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目的:支气管肺发育不良（BPD）作为早产的严重并发症,其病因复杂且预后不良。本研究试图通过研究DNA损伤修复蛋白NBS1在新生大鼠BPD模型中的动态表达规律,探索其对BPD发生、发展的影响,为阐明BPD氧化应激损伤的病理机制提供理论基础。研究方法:将100只新生SD大鼠在娩出的12小时内随机分配成BPD组（n=50）和对照组（n=50）。BPD组吸入氧浓度（Fi O2）为80%～85%（n=50）,对照组吸入空气（Fi O2=21%n=50）,两组分别于1、3、7、10、14day收取肺组织标本,分离后纯化、培养肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）。光镜下观察肺组织形态学改变、辐射状肺泡计数（RAC）来评估肺泡发育程度,免疫组化观测NBS1在肺组织中的定位及表达,细胞免疫荧光观察其在AECⅡ胞核及胞质中的定位;实时荧光定量PCR方法、蛋白质免疫印迹方法来检验NBS1基因及蛋白表达。结果:与对照组比较,BPD组RAC值从生后7d开始显著降低（P<0.01）,10d、14d时进一步下降（P<0.001）。免疫组化可见,NBS1蛋白主要定位在肺泡上皮细胞的细胞核内,相较于对照组,BPD组随暴露时间延长,浆染色细胞数量增多。细胞免疫荧光进一步验证,NBS1蛋白在AECⅡ的核质中均有表达,主要定位于细胞核内,对照组相比,BPD组3d开始细胞质染色增强、细胞核染色逐渐减弱（P>0.05）,7d、10d时细胞核内表达明显减低（P<0.05）,14d时主要定位于细胞质中（P<0.01）。NBS1的蛋白表达,对照组各组间无显著差异,与对照组相比,BPD组于生后1d升高并达峰值（P<0.01）,继之逐渐下降,3～10d仍比对照组高（P>0.05）,14d时低于对照组（P<0.05）。NBS1 m RNA表达水平,对照组之间无显著差异,与对照组相比,BPD组1d时明显升高并达到峰值（P<0.01）,继之逐渐下降,3d、7d、10d时低于对照组（P>0.05）,14d时明显低于对照组（P<0.05）。结论:在新生大鼠BPD模型中,NBS1蛋白作为DNA损伤修复的最早识别元件,由于其表达不足及核富集障碍,影响了DNA损伤应答,可能是BPD发生的机制之一。
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