A型肉毒毒素对兔植皮后皮片收缩相关因素影响的研究

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目的研究A型肉毒毒素(botulinum toxin type A, BTXA)对兔植皮术后皮片的成活及收缩相关因素:成纤维细胞数量、胶原纤维致密度及肌成纤维细胞标记性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达有无影响,同一皮片不同部位收缩情况是否相同。方法以预制好的模板,于兔背部沿脊柱两侧对称的用美兰各制备两排共4个2cmX2cm正方形供皮区,切取全厚皮片。此时供皮区形成创面,共20个创面。于每只兔背部随机选取2个创面,每个创面皮下均匀注射BTXA5U,此为S组,共10个创面;其余没注射BTXA的为空白对照D组,每个皮片根据中央区与周围区分为Z组与B组。在同一只兔上,将切取下来的皮片随机逐一植于供皮区的创面上。植皮中央缝合一针于皮下组织用以固定皮片。术后12天,大体观察切口愈合及植皮成活情况。组织学观察组织的HE染色标本中炎症细胞,成纤维细胞,胶原纤维的变化及α-SMA免疫组织化学染色标本中α-SMA表达;测量每张图片α-SMA的积分光密度值。结果大体观察S组与D组切口愈合及皮片成活无明显差异。光镜下实验组较对照组、周围组较中央组,真皮中炎症细胞减少,胶原纤维相对细小、致密度下降,排列较规则,大体走向更一致。成纤维细胞数量减少,较分散。表皮生长,真皮层厚度,小血管及皮肤附属器未见明显差异。S组与D组α-SMA的积分光密度值组间差异有统计学意义(P<0.01Pa-SMA=0.003),S组α-SMA的表达较D组明显减少;S组内的α-SMA的积分光密度值Z组与B组间差异有统计学意义(P<0.01:Pα-SMA=0.000),SB组α-SMA的表达量较SZ组明显减少;分析结果表明D组内的α-SMA的积分光密度值Z组与B组间差异有统计学意义(P<0.01:Pα-SMA=0.000),DB组α-SMA的表达量较DZ组明显减少。结论BTXA的注射不影响植皮的正常成活及切口的愈合。可以通过减少收缩过程中的成纤维细胞的数量,减少胶原的合成与沉积及炎症细胞的生成,从而抑制植皮的收缩;还可以通过减少肌成纤维细胞中α-SMA的表达实现抑制植皮的收缩。
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