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无脊椎动物主要依靠先天免疫系统抵御病原体的感染,在此过程中模式识别受体对病原微生物的识别是启动先天免疫反应的关键步骤。在对虾中,已发现的模式识别受体有十多种,但对C型清道夫受体及其功能了解的还不多。我们以日本囊对虾Marsupenaeus japonicus为研究对象,发现了 C型清道夫受体可以作为一种重要的模式识别受体促进对虾血细胞对病毒和多种细菌的吞噬作用以及调节抗菌肽基因的表达。(1)C型清道夫受体通过增强对虾血细胞的吞噬作用提高宿主抗病毒的能力至今已在多种无脊椎动物中发现有C型清道夫受体(SRC)的存在,然而SRC在抗病毒方面的研究报道还很少。在本研究中,我们首次从日本囊对虾,Mjaponicus,中克隆到了一种SRC基因,并将其命名为MjSRC。当对虾受到白斑综合征病毒(WSSV)的刺激以后,MjSRC在mRNA以及蛋白水平呈显著的上调表达。敲低MjSRC导致WSSV病毒的含量显著增加。同时,过表达MjSRC会有效地提高血细胞的吞噬率,从而降低对虾体内WSSV的含量。Pull-down实验结果表明MjSRC可以与WSSV的囊膜蛋白VP19相互作用。透射电镜的观察结果显示胶体金标记的MjSRC胞外域可以附着在WSSV的囊膜表面。在受到WSSV刺激后,MjSRC可以形成三聚体并伴随病毒的内吞而进入细胞质,这类内化过程依赖Mjβ-arrestin2的存在。进一步的实验结果表明MjSRC的胞内域可以与Mjβ-arrestin2相互作用,进而介导WSSV以网格蛋白依赖的方式进入细胞质。进入细胞质的病毒与溶酶体融合,当注射溶酶体抑制剂(氯喹)以后,病毒的拷贝数显著增加。本研究结果显示MjSRC通过其胞外域识别并结合WSSV,启动血细胞的吞噬作用,从而清除对虾体内的病毒。本文首次报道了 SRC作为一种模式识别受体参与对病毒吞噬和清除。(2)MjSRC在对虾抗细菌感染中的功能研究我们进一步研究了 MjSRC作为模式识别受体参与细菌的的识别和清除的分子机制。当对虾受到弧菌(Vibrio anguiarum)或金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)刺激以后,MjSRC的mRNA水平在血细胞中显著上调表达。MjSRC的胞外域(MAM和CCP结构域)具有体外结合不同细菌以及细菌来源多糖的功能。在敲低MjSRC表达的情况下,对虾血细胞的细菌清除能力和吞噬率与对照组相比显著下降。此外,MjSRC具有调节抗菌肽(AMPs)基因表达的功能。综上所述,MjSRC通过增强对虾的细胞免疫和体液免疫有效地保护对虾免受细菌的侵染。