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本研究以3个不同品系(‘ZD-1’、‘ZD-2’、‘ZD-3’)的铁皮石斛(Dendrobium candidum)幼苗为试验材料,分别于叶面喷施不同浓度的亚硒酸钠溶液(0.05mg·L-1、0.10mg·L-1、0.20mg·L-1和0.40mg·L-1)的外源硒处理,研究了O。C低温处理不同时间段(6和12h)及恢复生长过程中铁皮石斛组培幼苗的生理生化反应特性,探讨了外源硒对铁皮石斛(Dendrobium candidum)幼苗耐冷性和恢复生长能力的影响作用及其与有关抗氧化生理指标间关系。试验中主要测定了丙二醛(MDA)、叶绿素和类胡萝卜素含量,过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化氢酶(APX)活性、抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量,脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量,主要研究结果如下：1.在低温胁迫条件下,铁皮石斛植株体内积累大量MDA,叶绿素和类胡萝卜素含量有所降低,植株通过提高体内CAT、POD和APX活性来清除活性氧,AsA和GSH作为AsA-GSH循环的重要辅助物质也大量累积,脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量也增加以进行渗透调节,增强植株的耐冷性。且铁皮石斛对低温胁迫的耐性表现与品系存在密切联系,其中耐冷性表现较优良的品系的幼苗在低温胁迫下各指标的变化幅度要相对小于耐冷性较弱的品系。2.适量浓度的外源硒处理(0.05～0.10mg·L-1)对低温胁迫下铁皮石斛幼苗MDA累积、叶绿素和类胡萝卜素降解具有缓解效应,同时会引起幼苗抗氧化酶APX和POD活性显著提高、CAT活性降低,AsA和GSH含量增加显著,脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量也显著增加,提高铁皮石斛组培幼苗的耐冷性,但过高浓度的外源硒处理(>0.20mg.L-’)则效果相反,反而降低铁皮石斛幼苗的低温抗性。3.在恢复生长过程中,‘ZD-1’的CAT的活性在解除低温胁迫后上升,并在第4d达到最高,POD和APX活性以及MDA、脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量均随着恢复天数的增加而逐渐下降。AsA含量呈明显下降趋势,GSH含量在恢复2d后呈明显上升趋势,两者变化在各浓度硒处理下均表现出一定程度的负相关。经过适量浓度的外源硒处理(0.10mg·L-1)的‘ZD-1’在恢复生长6d后各生理指标基本恢复正常水平。4.MDA、叶绿素及类胡萝卜素、脯氨酸、可溶性糖及可溶性蛋白含量随低温处理时间的延长而呈现出一定的规律,表达了不同品种铁皮石斛受低温胁迫的程度,可以作为铁皮石斛低温耐性的参考指标。综上所述,较低浓度(0.05rmg.L’～0.10mg.L’)的硒可能通过AsA-GSH循环等参与铁皮石斛幼苗对低温逆境的抗氧化防御,从而减少ROS含量,降低植株过氧化伤害。因此,在铁皮石斛组培苗的栽培中,可以喷施一定浓度的硒以提高叶片的抗氧化能力,提高组培幼苗的成活率。