报春苣苔属植物花色变异的生化基础及转基因体系的构建

来源 :仲恺农业工程学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guojinwenv1
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报春苣苔属(Primulina)植物花色艳丽且变异丰富,整株花期较长,极具观赏性。本研究从遗传和发育两个角度分别对几种不同颜色的报春苣苔属植物及钟冠报春苣苔不同发育阶段的花色素苷成分和含量进行测定,揭示了报春苣苔花色艳丽的生化基础,并且以怀集报春苣苔为试材,建立了该属植物的转基因体系,为今后了解该属植物花色丰富变异的生理及遗传机制奠定了基础,有助于开展杂交育种及分子育种以进行花色种质创新。主要研究结果如下:(1)遗传方面,以38种报春苣苔属植物的新鲜花朵为试材,采用pH示差法测总花色素苷含量。结果显示花色越深,花色素苷的总含量越多,按照含量差异,从中选出13个物种用于花色素苷成分的鉴定,其中钟冠报春苣苔含有的花色素苷种类最多,为17种,白色的马坝报春苣苔和怀集报春苣苔及黄色的黄花牛耳朵不含有花色素苷,主要显色成分为黄酮类物质。(2)发育方面,以颜色最丰富的=钟冠报春苣苔为试材,通过花器官特异性研究发现,花瓣部分呈紫色是由于该部位蓝紫色的花色素(锦葵素、矮牵牛素及飞燕草素)的比例之和达到64.0%;而花筒部分的红色,是由于该部位矢车菊素及芍药花素分别占据了36.7%及20.0%。伴随着花发育过程,红粉色的花色素占据比例逐渐减小,而蓝紫色花色素所占比例渐趋增加,这可能是花瓣/花筒的比例伴随着花发育渐趋增大。开花前总花色素苷含量缓慢上升并趋于稳态(S2阶段有一峰值);而花盛开之后,含量急剧降低,这可能与花衰老进程的花色素苷降解相关。(3)转基因方面,以白色花的怀集报春苣苔为试材,利用农杆菌介导法建立了报春苣苔属植物高效快速转化体系,为花色育种提供条件。本实验以叶片为外植体进行植物组织培养,其中愈伤组织诱导培养基成分为MS培养基包含0.1 mg·L-1 TDZ和0.1mg·L-1 NAA,芽诱导培养基为MS培养基包含0.5 mg·L-1 TDZ和0.1 mg·L-1 NAA,所有的培养基均包含6 g·L-1琼脂和30 g·L-1蔗糖。恢复培养基中抗生素起始浓度为头孢噻肟500 mg·L-1,后期依次递减。用20 mg·L-1的潮霉素经过4次筛选后进行PCR检测,转化效率为20%。
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